[发明专利]一种能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的制备方法及应用。本发明以小麦面筋蛋白为原料，经双螺杆挤压机挤压、均质预处理、酶解、醇沉以及大孔树脂柱层析，制备得到能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽。本发明制得的小麦面筋蛋白肽能显著提高酿酒酵母细胞的渗透压耐受性，将其应用于高浓度或高密度发酵过程中，可有效地提高酿酒酵母细胞的渗透压耐受性、细胞活性和出芽率。

技术领域

本发明涉及蛋白肽技术领域，具体涉及一种能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的制备方法及应用。

背景技术

在新能源发展的今天，乙醇作为一种清洁能源备受关注，然而我国当前乙醇生产中成本、能耗较高而效率低，因此在生产酿造过程中，寻找并应用低碳酿造新技术以提高质量和生产效率、降低生产能耗和成本变得尤为重要、迫切。而超高浓酿造技术由于可在不增加发酵设备的基础上大幅度提高乙醇产量、提高生产效率和降低能耗，而日益受到酿造企业的青睐。但在超高浓酿造过程中，过高的糖度使得发酵初期渗透压较高，这种环境压力会使酵母生长代谢受到影响，并且引起发酵滞缓或停止。因此提高酵母渗透压耐受性变得尤为重要和迫切。然而酵母对渗透压耐受性一直是限制超高浓酿造发展中的一个难点。

距今发现多种生物肽具有如抗高血压、抗血栓、抗氧化抗癌、抗疟疾、抗菌、阿片样活性、降低胆固醇、耐冻、促发酵以及提高免疫调等活性，其中关于小麦面筋蛋白水解物促酵母增殖和发酵的报道启发：小麦面筋蛋白肽用于提高酵母渗透压耐受性的制备探索。此外，目前均未有相关文献报道小麦面筋蛋白肽具有提高酵母渗透压耐受性的作用。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供了一种能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的制备方法。该制备方法以小麦面筋蛋白为原料，经双螺杆挤压机挤压、均质预处理、酶解、醇沉以及大孔树脂柱层析，制备得到能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽。

本发明的目的还在于提供上述制备方法制得的能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的应用。上述方法制备的小麦面筋蛋白肽能有效提高酿酒酵母细胞的渗透压耐受性，可有效应用于提高酿酒酵母细胞的渗透压耐受性、高渗透压下的细胞活性、高渗透压下维持酿酒酵母细胞的表观形态或高渗透压下提高酿酒酵母细胞的出芽率。

本发明的目的通过如下技术方案实现。

一种提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽的制备方法，包括如下步骤：

(1)小麦面筋蛋白的预处理：将小麦面筋蛋白经双螺杆挤压机挤压后，再加水混合，均质，得到小麦面筋蛋白料液；

(2)小麦面筋蛋白的酶解：将小麦面筋蛋白料液加热后，调节体系pH值，再加入蛋白酶，恒温搅拌下进行酶解；酶解完成后，灭酶，冷至室温，离心，去除沉淀，得到小麦面筋蛋白酶解清液；

(3)小麦面筋蛋白酶解清液的醇沉处理：将小麦面筋蛋白酶解清液减压浓缩后，加入无水乙醇进行醇沉除去大分子蛋白和多肽，上清液经冷冻干燥，得到小麦面筋蛋白醇沉清液冻干粉；

(4)柱层析：将小麦面筋蛋白醇沉清液冻干粉溶解于水后装入大孔树脂层析柱，用水洗脱，得到的洗脱液经冷冻干燥，得到所述能提高酿酒酵母细胞渗透压耐受性的小麦面筋蛋白肽。

进一步地，步骤(1)中，所述复合改性为双螺杆挤压机挤压的工艺条件为：加入小麦面筋蛋白质量10～20％的水混合后，在螺杆转速150～300r/min下挤压，挤压温度为70～140℃，出料模孔直径5mm。

进一步地，步骤(2)中，经双螺杆挤压机挤压后的小麦面筋蛋白与水的混合质量比为1～4∶10。

进一步地，步骤(2)中，所述加热是加热至40～50℃。

进一步地，步骤(2)中，所述调节体系pH值是调节体系pH值为6.0～9.0。