[发明专利]一种花椒内生放线菌HJG-5及其应用

说明书

一种花椒内生放线菌HJG‑5及其在生产促生长活性物质、广谱抑菌活性物质方面的用途。本发明的有益之处在于：本发明中的一种花椒内生放线菌HJG‑5是从花椒的各组织中分离纯化筛选到的抑菌谱广、抑菌效果显著的菌株；菌株HJG‑5的发酵液中含有促生长活性物质和广谱抑菌活性物质，为丰富生物农药天然资源和微生物农药的开发研究奠定了基础。

技术领域

本发明属于微生物发酵及应用技术领域，具体涉及一种花椒内生放线菌HJG-5及其应用。

背景技术

植物病害是威胁农业生产的主要因素之一，而目前在我国的农业生产中，化学合成农药由于抗菌谱广、防效高、见效快的特点，在病害防治上一直占据主要地位，但随着其长期超用、滥用、误用造成的3R问题也越来越严重。随着可持续发展观念的深入人心以及人们对食品安全的关注，寻求安全、高效、符合可持续发展理念的新的防治途径，成为了植物病害防治亟待解决的课题。利用微生物或其代谢产物防治病害，因其高效低毒、选择性强，对生态环境影响小且兼具增产增收等特点，成为当前的研究热点。植物内生放线菌与其寄主在共生过程中，形成了和谐的关系，其寄主广泛、种类复杂多样，产生的抑菌活性物质种类繁多，具有广阔的应用前景。Verma等从Azadirachta indicaA.Juss的根部组织中分离得到三株内生链霉菌，发现其悬浮液处理种子后，可显著促进植株的生长，并可抑制链格孢病原菌的生长繁殖。Misk等人从澳大利亚的多种植物中分离得到11株内生放线菌，发现其均可抑制疫霉根腐病菌的生长，且菌株WRA1可显著促进植株生长。王真真等从水稻植株中分理筛选出一株可显著抑制稻瘟病菌生长的内生放线菌-米修链霉菌OsiRt-1，大田条件下对水稻苗瘟、穗瘟的防效分别为7.76％、25.65％。因此，筛选植物内生拮抗放线菌，研究其生防作用与生防机制，对微生物农药的实际生产应用具有重要的现实意义。

花椒既可作香料的原料又可入药。其药用价值在《神农本草经》和《本草纲目》中均有记载，可散寒除湿，温中止痛。韩胜男发现花椒挥发油对HeLa、A549、K562有较强的抑制作用。Ge,PauL等从花椒中提取的化合物中的一种主要成分可抑制麦蛾产卵，且对其幼虫有较强的拒食作用。Singh等研究发现花椒精油不能控制米象的繁殖但是可保护小麦免受损害。Navarrete等发现花椒茎皮煎煮后可减少羊体内肠线虫的数量，其氯仿提取物α-山椒素对蛔虫有剧烈毒性。Paik等发现花椒果皮挥发性物质可抑制HepG2肝癌细胞。但是目前对花椒内生放线菌的研究还未见相关报道。

近年来，化学农药的大量使用导致农产品出口受限，抗药性，环境污染等问题的产生，急需要开发新型高效、广谱、低毒、环保的生物抑菌剂。

发明内容

本发明提供一种花椒内生放线菌HJG-5，菌株HJG-5的发酵液中含有促生长活性物质能够促进植物生长，而且含有高效、广谱、低毒、环保的抑菌活性物质能够起到很好的抑菌作用。

一种花椒内生放线菌HJG-5，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日：2017.11.30，保藏登记号为14969。

进一步地，通过分子生物学研究确定，HJG-5菌株可以归为肉桂栗色链霉菌。

更进一步地，花椒内生放线菌HJG-5菌株在燕麦粉琼脂培养基上培养2-3d，菌落表面光滑呈白色，培养至第6d后开始有白色的气生菌丝从菌落边缘长出，8d后开始逐渐变为浅灰色；培养过程中菌落形态为圆锥形隆起，菌落边缘有4-6圈的同心轮纹，外围有晕状壤边；通过显微观察，气生菌丝发达、分支较多，基内菌丝无横隔、不断裂。

更进一步地，花椒内生放线菌HJG-5菌株的培养特征为，在ISP2、PDA和营养琼脂上菌落表面隆起呈致密的绒粉状，气生菌丝发达，为白色或灰白色，基内菌丝棕黄色或黄褐色；在ISP5上气生菌丝为浅灰色，基内菌丝为淡鹅黄色；在ISP4、察氏和高氏一号培养基上生菌丝稀薄，多呈很淡的白灰色，无基内菌丝；在ISP3上几乎不生长。