[发明专利]一种双层人工血管及其制备方法

权利要求书

1.一种双层人工血管的制备方法，其特征在于，包括步骤：

1)制备介孔miRNAs控释纳米球；

2)将介孔miRNAs控释纳米球与肝素钠混合制成药物溶液；

3)将步骤2)中获得的药物溶液作为芯层，可降解聚合物纺丝液作为皮层，用同轴静电纺丝法纺得双层人工血管内层；

4)用热致相分离法将外层聚合物材料制成双层人工血管的外层；

步骤1)进一步包括以下步骤：

A)将一定量的MSNs-COOH均匀分散到DMSO中制成分散液一；

B)称取一定量的EDC、NHS加入到上述分散液一中活化MSNs-COOH上的羧基；

C)将PEI水溶液滴加入步骤B)获得的经羧基活化后的分散液一中，然后恒温振荡反应获得产物MSNs-PEI，清洗所述产物；

D)将miRNAs溶于一定量的DMF中，加入一定量的EDC、NHS活化；

E)将步骤C)获得的MSNs-PEI分散到DMF中制成分散液二；

F)将活化的miRNAs溶液加入到分散液二中，然后恒温振荡反应，获得产物miRNAs@MSNs纳米球。

2.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤A)中所述羧基化的介孔硅粒径在120～150nm之间，纳米硅表面羧基密度为3.0×10^-2nmol/mg～3.5×10^-2nmol/mg。

3.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤B)和步骤D)中加入EDC与NHS的摩尔比为2～3:1。

4.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤C)中聚乙烯亚胺的重均分子量为1800，每个聚乙烯亚胺分子上含有40个氨基(-NH₂)，聚乙烯亚胺水溶液的浓度为50～80mg/mL，恒温振荡反应的温度为37℃；MSNs-COOH与PEI反应中羧基与氨基的摩尔投料比为1:1.2～1:1.5。

5.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤D)中的miRNAs为荧光染料标记Cy5标记的miRNAs。

6.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤E)制得的分散液二中MSNs-PEI的浓度为5～10mg/mL。

7.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤F)中MSNs-PEI与miRNAs的摩尔投料比为比为1:1～1:2.5，恒温振荡反应的温度为37℃。

8.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤3)中同轴静电纺丝法中芯层的推进速度为0.02～0.1mL/h，芯层针头的内径范围为0.20～0.45mm，皮层溶液推进速度为1.0～2.0mL/h，皮层针头的内径范围为0.50～0.70mm。

9.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤3)中可降解聚合物纺丝液的浓度根据不同的聚合物相适应，溶质质量(g)/溶剂体积(mL)浓度为5％～10％。

10.如权利要求1所述的双层人工血管的制备方法，其特征在于，步骤4)中外层的制备方法具体为：将大孔纳米纤维层的聚合物材料的热熔液浇铸至已装配好内层介孔miRNAs控释纳米球/肝素复合修饰的可降解纳米纤维层的聚四氟乙烯模具中，然后低温冷冻、干燥一段时间后脱模，得到介孔miRNAs控释纳米球/肝素复合修饰的双层人工血管。