[发明专利]抗氧化肽及其制备方法及包含该抗氧化肽的化妆品在审
申请号: | 201810108051.4 | 申请日: | 2018-02-02 |
公开(公告)号: | CN108059662A | 公开(公告)日: | 2018-05-22 |
发明(设计)人: | 葛啸虎;陈海佳;王一飞;王小燕 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06;A61K8/64;A61Q19/08 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 欧阳柏乐 |
地址: | 510000 广东省广州市广州开发*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氧化 及其 制备 方法 包含 化妆品 | ||
1.一种抗氧化肽,其特征在于,所述抗氧化肽包括如下若干肽段:
肽段M1的氨基酸序列组成为SEQ ID NO.1:Tyr-Leu-Ser-Trp-Lys-Leu
肽段M2的氨基酸序列组成为SEQ ID NO.2:Leu-Leu-Thr-Asp-Val-Tyr-Gln
肽段M3的氨基酸序列组成为SEQ ID NO.3:Val-Ser-Leu-Trp-Pro-Cys-Arg。
2.根据权利要求1所述的抗氧化肽,其特征在于,所述抗氧化肽的分子量在400-1600Da之间。
3.一种如权利要求1所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)选取乌贼,去除内脏,并用水清洗干净,然后均质成肉泥;
2)按质量体积比为1:3至1:5的料液比加水得到混合液,调解混合液的pH值7.0-8.0,加入蛋白酶酶解,蛋白酶的添加量为每克肉泥中加入500U-1500U,在40-60℃下酶解处理2-3h,灭酶,离心,取上清液;-
3)将所述上清液用20000Da的超滤膜分离,并取分子量20000Da以下的超滤液,冷冻干燥制得肽粉A;
4)将所述肽粉A按20-25mg/mL浓度比例溶解于蒸馏水中,并经过层析柱分离纯化,收集分子量在400-1600Da之间的纯化液,浓缩,冷冻干燥得到肽粉B,然后用去离子水配制1mg/mL溶液,过0.22-0.30μm微孔滤膜,用反向液相色谱进一步分离纯化,再经活性筛选,干燥后得到抗氧化肽。
4.根据权利要求3所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶包括木瓜酶或胰蛋白酶的一种或两种的组合。
5.根据权利要求3所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶为胰蛋白酶和木瓜酶,所述胰蛋白酶与所述木瓜酶的质量比为1:3-1:5。
6.根据权利要求3所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述层析柱为SephadexG-10层析柱或Sephadex G-25层析柱。
7.根据权利要求3所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述反向液相色谱的色谱柱为C18色谱柱。
8.根据权利要求3所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述反向液相色谱采用梯度洗脱。
9.根据权利要求8所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,所述梯度洗脱的洗脱条件为:0.001-9min,水洗脱;9-40min,0.001%-100%乙腈水溶液浓度由0.001%线性递增至100%;40-50min,乙腈洗脱。
10.一种包括权利要求1或2所述的抗氧化肽的化妆品。
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