[发明专利]用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸及其制备方法和使用方法

说明书

本发明公开了一种用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸，包括样片垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和背板，所述样片垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘附在背板上，所述金标垫上包被有TP重组抗原I‑质控组分‑胶体金标记物，所述硝酸纤维素膜上分别包被有链霉亲和素‑生物素‑TP重组抗原II构成的检测线和质控线。本发明以唾液为检测样本，灵敏度高，特异性强，操作便捷，安全无创伤，适于现场检测。

技术领域

本发明涉及一种胶体金试纸，特别是，涉及一种用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸及其制备方法和使用方法。

背景技术

检测血液中的梅毒螺旋体抗体一直被认为是诊断梅毒的前提。传统的血液检测法检测周期较长，而且还存在交叉感染的危险。近来研究表明，除血液标本外，梅毒感染者的尿液、唾液、精液、阴道分泌物中均可检测到抗梅毒螺旋体抗体。唾液和血液同作为人体体液的一部分，成分大多相似。临床检测中目标物质在唾液和血液中的出现较为一致，仅浓度存在差异，这些发现为梅毒检测提供了一个全新的发展方向。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种高灵敏度的用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸，操作便捷，安全无创伤，不需要特殊设备及专业培训，适于与现场筛查。

为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸，包括样片垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和背板，所述样片垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘附在背板上，所述金标垫上包被有TP重组抗原I-质控组分-胶体金标记物，所述硝酸纤维素膜上分别包被有链霉亲和素-生物素-TP重组抗原II构成的检测线和质控线。

优选的，所述TP重组抗原I为TP重组抗原MD07，所述质控组分为鼠IgG，所述TP重组抗原II为TP重组抗原MD06，所述质控线由羊抗鼠IgG构成。

本发明还涉及一种用于检测唾液中梅毒螺旋体抗体的胶体金试纸的制备方法，包括：

S101.胶体金的制备：用氯金酸溶液和柠檬酸三钠溶液制备小颗粒胶体金溶液，再加入氯金酸溶液和巯基丁二酸溶液制备含羧基的大颗粒胶体金溶液；

S102.TP重组抗原标记：将重组抗原MD07加入大颗粒胶体金溶液中，制备TP重组抗原MD07-胶体金标记物；

S103.鼠IgG标记：将鼠IgG加入小颗粒胶体金溶液中，制备鼠IgG-胶体金标记物；

S104.金标垫的制备：将TP重组抗原MD07-胶体金标记物和鼠IgG-胶体金标记物混合后浸泡玻璃纤维，制得金标垫；

S105.TP重组抗原包被：在硝酸纤维素膜上分别包被链霉亲和素-生物素-TP重组抗原MD06构成的检测线和羊抗鼠IgG构成的质控线；

S106.试纸的制备：将样片垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘附在背板上，即得。

进一步的，所述步骤S101具体为：在圆底烧瓶中加热1L超纯水至沸腾，向沸水中加入氯金酸溶液，然后快速加入柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀，保持溶液沸腾，直到液体呈酒红色停止加热，冷却至室温后补足1L，得到小颗粒胶体金溶液；取0.5L小颗粒胶体金溶液于三角瓶中，搅拌的同时缓慢加入氯金酸溶液和巯基丁二酸溶液，在滴加过程中溶液颜色逐渐变成深红色，待颜色不再变化停止搅拌，制得含羧基的大颗粒胶体金溶液。

进一步的，所述步骤S102具体为：取含羧基的大颗粒胶体金溶液，采用碳二亚胺和N-羟基硫代琥珀酰亚胺活化羧基后，离心去除上清液；加入TP重组抗原MD07使得溶液中TP重组抗原MD07浓度为0.05mg/ml，搅拌并加入BSA溶液进行封闭后，离心弃去上清液，沉淀用缓冲液悬浮，保存备用。