[发明专利]一种制备小菜蛾雄性不育品系的方法及其核酸有效
| 申请号： | 201810111395.0 | 申请日： | 2018-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN110117619B | 公开（公告）日： | 2022-10-11 |
| 发明（设计）人： | 黄勇平;陈希恩;王耀辉;牛长缨 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;A01K67/033 |
| 代理公司： | 上海恒慧知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 31317 | 代理人： | 张宁展 |
| 地址： | 200032 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 小菜 雄性不育 品系 方法 及其 核酸 | ||
1.一种制备雄性不育的小菜蛾的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)合成sgRNA，所述的sgRNA的模板从5’端到3’端包括以下可操作性元件：T7启动子，Ser2基因靶点和gRNA；
2)合成Cas9 mRNA，所述的Cas9 mRNA的模板从5’端到3’端包括：启动子，Cas9编码序列和SV40终止子；
3)将步骤1)所得的sgRNA和步骤2)所述的Cas9 mRNA混合后显微注射小菜蛾新鲜卵中，孵化，即得雄性不育的小菜蛾。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的Ser2基因靶点的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的sgRNA的模板的核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的Cas9 mRNA的模板的核苷酸序列如SEQID NO:3所示。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述的sgRNA和所述的Cas9 mRNA是等摩尔量混合。
6.一种防治小菜蛾的方法，其特征在于，包括以下步骤：将如权利要求1所述的方法制备而得的雄性不育的雄性小菜蛾野外放生，通过与野生小菜蛾交配，使后代减少，降低种群数量。
7.一种制备雄性不育的小菜蛾的核酸，其特征在于，所述的核酸从5’端到3’端包括以下可操作性元件：T7启动子，Ser2基因靶点和gRNA；所述的核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
8.一种制备雄性不育的小菜蛾的核酸混合物，其特征在于，包括如权利要求7所述的核酸和Cas9 mRNA。
9.如权利要求8所述的核酸混合物，其特征在于，所述的Cas9 mRNA的模板的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
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