[发明专利]一种使用改良的光照培养架进行稻瘟病接种鉴定的方法

说明书

本发明公开了一种水稻秧苗种植和稻瘟病菌接种鉴定的方法，包括下列步骤：①光照培养架的改造；②水稻育苗；③稻瘟菌制备；④稻瘟病菌接种；⑤病害调查。本发明操作过程简单，可以快速、高效、节能地对水稻品种的稻瘟病抗性进行鉴定。改造过的光照培养架上能够较好的满足水稻幼苗接种稻瘟病菌时对温度、湿度和光强度的要求，解决了水稻稻瘟病菌接种过程中水稻幼苗对高湿度和光照的要求，以及接种稻瘟病菌过程中的耗时、耗力和低效率的问题。为稻瘟病菌的高效鉴定提供了保证，适用于所有植物病害和虫害的抗性鉴定工作。

技术领域

本发明属于农业植物保护技术领域，具体涉及一种水稻秧苗种植和稻瘟病菌接种鉴定的方法。

背景技术

由稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病，是威胁全国水稻生产的最重要病害之一；选育和种植抗病品种是控制该病害最经济、有效的措施。但稻瘟病菌在漫长的进化过程中形成了遗传上的复杂多样性，其快速的变异致使抗病品种经过3-5年的大面积种植便失去抗性。对水稻品种抗稻瘟病的基因型进行推导，可以为选育合适的抗瘟品种和指导品种合理布局提供依据。研究稻瘟病菌生理小种致病性分化，掌握其变化规律以及快速监测技术是目前所迫切需要的任务。

我国对稻瘟病菌生理小种的研究主要依据在小种鉴别品种上的致病性反应划分类群，这一方法简便易行，且有较高的实用意义，多年来的研究结果也对抗病育种起了重要的指导作用，但也存在着工作量大、所需时间长，而且易受外界环境因素的影响等不足之处。特别是在温室内对水稻进行苗期抗性鉴定时，离体接种操作步骤繁琐，耗时耗力，接种不同菌株的水稻品种在空间隔离方面还存在很大的难度。活体接种虽然步骤相对简单，但种植于光照培养箱中的水稻秧苗的生长空间受到很大的限制且由于光照强度达不到要求造成黄叶和苗身细长等，另光照培养箱中的湿度一般在达不到95％，能达到的仪器由于雾气等原因影响光照，且秧苗的种植规模较小，特别是接种不同的稻瘟病菌后，空间隔离上存在操作和技术是上的困难。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的缺点和不足，提供一种使用改良的光照培养架进行水稻秧苗种植和稻瘟病菌接种鉴定的方法，克服了现有技术上和操作上的困难，简单可行、成本低、周期短，为水稻品种的稻瘟病菌快速高效的抗性鉴定提供了保证。

为了达到上述技术目的，本发明具体通过以下技术方案来实现：

一种水稻秧苗种植和稻瘟病菌接种鉴定的方法，包括以下步骤：

1)光照培养箱的改造

在普通的光照培养箱内(六面：上下左右前后)铺设反光布，并在光照培养箱的侧壁上开设孔洞；

2)水稻育苗

将水稻种子催芽后播于白瓷盘中，放置于光照培养箱中，苗期温室保持25-28℃；

3)稻瘟病菌制备

将活化后的稻瘟菌株转入番茄燕麦培养基，黑暗培养5-7天后刮去菌丝，置于蓝光、26℃下开盖产孢2-4天，用0.02％的tween-20溶液洗下孢子，过滤后离心弃上清液，加0.02％的tween-20溶液调节孢子浓度待用；

4)稻瘟病菌接种

将稻瘟病菌悬液接种于健康秧苗上，关闭光照、加湿器开启黑暗保湿24h后，打开光照、相对湿度保持100％，温度保持在27+0.5℃，5天后调查发病情况。

5)病害调查

病斑分6级，分级标准如下：

0级——叶面上无病斑；

1级——叶面上出现针尖大小的褐色小点；

2级——病斑褐色，直径约为0.5～1mm；

3级——病斑直径介于1～2mm，中央灰白色，边缘褐色；