[发明专利]一种实时荧光定量PCR检测RCL的试剂和方法

权利要求书

1.一种试剂组，其特征在于，所述的试剂组包括：

(i) 特异性扩增VSV-G基因的第一引物对和第一探针，

其中，所述的第一引物对包括：

第一上游引物：5’-GAAAGGGAACTGTGGGATGACT-3’，序列如SEQ ID NO: 1所示，和

第一下游引物：5’-GAACTGGTCCTCAGAACTCCATT-3’，序列如SEQ ID NO: 2所示；

并且，所述的第一探针为：

5’-6-FAM-CATATGAAGACGTGGAAATTGGACCC-MGB-3’，序列如SEQ ID NO: 3所示；和/或

(ii) 特异性扩增VSV-G基因的第二引物对和第二探针，

其中，所述的第二引物对包括：

第二上游引物：5’-GGATGTGTCATGCTTCCAAATGG-3’，序列如SEQ ID NO: 4所示，和

第二下游引物：5’-GTGAAGGATCGGATGGAATGTGTTA-3’，序列如SEQ ID NO: 5所示；

并且，所述的第二探针为：

5’-6-FAM-ACCAGCGGAAATCACAAGTAGTG-MGB-3’，序列如SEQ ID NO: 6所示；

所述试剂组用于检测具有复制能力的慢病毒RCL，并且所述的慢病毒以疱疹性口腔炎病毒G蛋白(VSV-G)为包膜蛋白。

2.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述的试剂组还包含：

(iii)特异性扩增内参基因的第三引物对和第三探针，

其中，所述的第三引物对包括：

第三上游引物：序列如SEQ ID NO: 27所示，和

第三下游引物：序列如SEQ ID NO: 28所示；

并且，所述的第三探针序列如SEQ ID NO: 29所示。

3.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述的试剂组还包含：

(iii)特异性扩增内参基因的第三引物对和第三探针，

其中，所述的第三引物对包括：

第三上游引物：序列如SEQ ID NO: 25所示，和

第三下游引物：序列如SEQ ID NO: 26所示；

并且，所述的第三探针序列如SEQ ID NO: 27所示。

4.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述试剂组包括所述的(i) 特异性扩增VSV-G基因的第一引物对和第一探针；和所述的(ii) 特异性扩增VSV-G基因的第二引物对和第二探针。

5.如权利要求2所述的试剂组，其特征在于，所述试剂组包括所述的(i) 特异性扩增VSV-G基因的第一引物对和第一探针；所述(ii) 特异性扩增VSV-G基因的第二引物对和第二探针，和所述的(iii) 特异性扩增内参基因的第三引物对和第三探针。

6.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述试剂组检测RCL的扩增效率≥90%。

7.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述试剂组检测RCL的扩增效率≥92%。

8.如权利要求1所述的试剂组，其特征在于，所述试剂组检测RCL的扩增效率≥95%。

9.一种PCR扩增体系，其特征在于，所述的扩增体系包括：用于扩增的缓冲体系以及位于所述体系中的权利要求1所述的试剂组。

10.一种检测试剂，其特征在于，所述的检测试剂中含有权利要求1所述的试剂组。

11.一种检测试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂盒中包含一个或多个容器，和位于所述容器中的如权利要求1所述的试剂组。