[发明专利]一种利用miR-203/SNAI2轴调节前列腺癌细胞在体外迁移的方法

说明书

本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测和治疗前列腺癌(PCa)的方法。本发明提供了miR‑203/SNAI2轴对前列腺癌的体外生物学特性的影响。具体的，在DU145和PC3细胞中表达miR‑203抑制SNAI2表达。miR‑203抑制了前列腺癌细胞的增殖、迁移、内皮细胞形成和肿瘤干细胞的形成。

技术领域

本发明涉及分子检测技术领域，尤其涉及microRNA检测和治疗前列腺癌(PCa)的方法。本发明提供了miR-203/SNAI2轴可作为PCa的诊断和治疗靶点。

背景技术

前列腺癌(PCa)是如今全球第二常见男性癌症死亡的主要原因之一。PCa的形成和发展是多步骤的过程，包括正常前列腺上皮癌变前的病变转变，高档前列腺上皮内瘤(PIN)，局部侵袭性前列腺癌和远距离转移。广泛的研究表明，对特定基因包括微小RNAs(miRNAs)和长非编码RNA(lncRNAs)的解除管制，是PCa的发病机制和进展的主要原因。尽管如此，与其他癌症相比，PCa中miRNA的表达模式和功能仍未被完全阐明，尽管有证据表明，在PCa的肿瘤发生和化疗抵抗中，miRNA表达的全球解除管制。确定miRNAs在前列腺肿瘤形成和进展中的作用机制，对我们更好地了解前列腺癌的性质有重要作用，并且有助于确定治疗干预的潜在靶点。

MicroRNA是一类长度约20-24个核苷酸序列的短小非编码mRNAs，通过转录绑定3’-未翻译区(3’-UTRs)抑制目标基因的表达。MiRNAs参与调控包括致癌在内的多种生理和病理过程。对miRNAs的解除管制有助于多种癌症的发展，包括PCa。例如，下调PCa中的肿瘤抑制物，包括miR-101、miR-126*、miR-145、miR-146a、miR-224、miR-330、miR-34a、miR-200家族，发现与先进的临床分期、肿瘤转移和异位表达相关的致癌miRNAs包括miR-221/222、miR-21、miR-141、miR-18a和miR-125b，这表明PCa进展有更高的风险。

SNAI2编码了Snail家族C2H2锌指转录因子，并参与了不同癌症的发展。SNAI2作为一种转录抑制因子，通过与E-box的结合来调节与DNA的序列特异性的相互作用。该蛋白参与上皮间充质转移并控制干细胞，这揭示了这一转录因子在肿瘤转移中具有重要意义。SNAI2在包括前列腺在内的人体组织中广泛表达。在体内异种移植实验表明，SNAI2促进前列腺癌细胞的迁移和侵袭，并介导了细胞周期蛋白D1诱导的肿瘤发生。PCa中SNAI2的沉默抑制了多能性基因的表达，激活了特异性的转移抑制因子。在选择的PCa细胞中，SNAI2的异位表达促进了它们的自我更新，并增加了转移潜能，使其具有高度恶性的特性。SNAI2可能是防止PCa进展的分子方法的关键目标。然而，在前列腺癌的形成和发展过程中，miRNAs与SNAI2之间的相互作用并没有得到很好的阐明。

越来越多的证据表明，miR-203参与多种生理和病理过程，包括上皮分化、癌细胞增殖、转化和凋亡。有趣的是，不同的文献表明，miR-203参与GSK-3β/β-CATENINN通路。例如，Annie Zhang等人报道，miR-203抑制了与PIK3CA、p38 MAPK、c-Jun和GSK-3信号信号相关的肝癌的增殖。在黑素瘤细胞，β-catenin压制转录miR-203。

在本研究中，我们旨在系统地阐明miR-203/SNAI2在前列腺癌中的确切作用。我们表明，miR-20/SNAI2轴调控肿瘤发生，血管生成，具备干细胞能力，在前列腺癌转移可能通过调节GSK-3β/β-CATENIN信号通路。这些发现为miR-203和SNAI2在恶性细胞中的作用提供了新的见解。

发明内容