[发明专利]一种太子参种苗快速繁殖的方法在审
申请号: | 201810115540.2 | 申请日: | 2018-02-06 |
公开(公告)号: | CN108157181A | 公开(公告)日: | 2018-06-15 |
发明(设计)人: | 黄刚;郑晓峰;付燕;周黎;万新屏;何宪江 | 申请(专利权)人: | 黔东南民族职业技术学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 重庆鼎慧峰合知识产权代理事务所(普通合伙) 50236 | 代理人: | 朱浩 |
地址: | 556000 贵州省黔东南苗族*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 太子参 快速繁殖 试管苗 种苗 移栽 培养基添加物 生存率 不定根诱导 不定芽诱导 产业化生产 丛生芽诱导 长期稳定 地下块根 无菌处理 植株生长 组织培养 外植体 驯化 优化 健康 | ||
本发明涉及一种太子参种苗快速繁殖的方法,包括以太子参的冬芽为外植体无菌处理,不定芽诱导,丛生芽诱导,不定根诱导等组织培养,再驯化移栽,通过优化各步骤中具体参数及培养基添加物的组合,提高太子参试管苗的质量,以进一步提高太子参试管苗在移栽后的生存率,并且植株生长健康,地下块根变大,提高太子参产量。为产业化生产太子参提供可靠的方法,以促进太子参产业长期稳定发展。
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域,涉及一种太子参种苗快速繁殖的方法。
背景技术
太子参为常用中药,别名孩儿参、童参、双批七、四叶参或米参,为多年生草本植物,是石竹科植物异叶假繁缕(P seudostellariaheterophylla(Miq)Pax.etHoffm)的干燥块根。以其块根入药,是一种珍贵的中药材,其药性平和,可作为人参乃至西洋参的代用品,老少服用皆宜。市场需求量大。贵州省是我国药材主要产区之一,贵州省施秉县已成为全国太子参种植主产区之一。目前太子参的繁殖方法有种子繁殖和块根繁殖2种,因太子参果实为蒴果,种子成熟不一致,果实开裂,种子会自然脱落,造成种子不易采收;另外,太子参成熟的种子具有休眠特性,种子萌发率低,因此生产中通常采用块根进行无性繁殖(块根繁殖)。块根繁殖最直接的方法就是选用种参进行繁殖;但生产上长期以种根进行无性繁殖,太子参病毒病发生普遍,病情日趋严重,种根质量退化严重,种源混杂现象普遍存在,品质差,产量大幅度下降,种植户积极性受到严重的打击。为防止太子参病毒以无性繁殖的方式传给子代,利用太子参茎尖组织快速繁殖和脱毒是解决太子参种苗的有效途径。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种太子参种苗快速繁殖的方法。
为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:
1.一种太子参种苗快速繁殖的方法,包括以下步骤:
1)外植体处理:以太子参的冬芽为外植体,洗洁净浸泡6-10min后用水冲洗,无菌环境下用75%酒精浸泡30~60s,再用无菌水冲洗2-4遍;0.1%升汞处理10~12min后再用无菌水冲洗7-8遍,无菌纸吸干水分后剥离茎尖,接种到太子参不定芽诱导培养基上;
2)不定芽的诱导:将灭菌好的茎尖接种到不定芽诱导培养基,待生成不定芽;所述不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L+IBA0~0.05mg/L+水解酪蛋白0.3~0.5g/L+糖30~40g/L+琼脂4.0~5.0g/L,pH5.6-5.8。
3)丛生芽的诱导:将步骤2)中的不定芽接种MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.2mg/L+水解酪蛋白0.1~0.3g/L+糖30~40g/L+琼脂4.0~5.0g/L,pH5.6-5.8丛生芽培养基中,待生成丛生芽;
4)不定根的诱导:将步骤3)经多次继代后,生长健壮的小苗,接种于MS+NAA0.2mg/L+糖30~40g/L+琼脂4.0~5.0g/L,pH5.6-5.8培养基中;
5)驯化移栽:将生根的太子参苗进行炼苗驯化3~7天,洗净琼脂后用500倍多菌灵消毒,移栽至基质中培养。
进一步,所述步骤2)至4)中,培养条件为:温度25±1℃,光照时间为12h.d-1,光照强度为1500-2000Lx。
进一步,所述步骤2)中不定芽诱导培养基为:MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L+水解酪蛋白0.3g/L+糖30~40g/L+琼脂4.0~5.0g/L,pH5.6-5.8。
进一步,所述步骤2)中不定芽诱导培养基为:MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L+水解酪蛋白0.3g/L+糖30~40g/L+琼脂4.0~5.0g/L,pH5.6-5.8。
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