[发明专利]一种生物素化抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种生物素化抗体及其制备方法和应用，所述制备方法包括以下步骤：制备待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系；向待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系中加入生物素溶液，进行反应；将反应后的体系在缓冲液中进行渗析，而后进行纯化处理，得到所述生物素化抗体。本发明制备的生物素化抗体可以显著增加免疫检测的灵敏度和信号强度，并且本方法操作简单，易于完成且不会引入其他不确定因素，对免疫检测试剂盒质量的提高有可预见的作用，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，涉及一种生物素化抗体及其制备方法和应用。

背景技术

由于细胞因子在体内含量甚微，对其进行检索面临这一定困难，目前主要应用的检测方法主要有三类，即生物学方法、免疫学方法和核酸检测法，其中生物学方法和核酸检测方法虽然灵敏度较高，但实验操作繁琐复杂，所需实验条件较为严苛，而免疫学方法以其方法简单、操作容易、不需要复杂仪器，一次可检索多个样品而深受欢迎，然而普通的ELISA方法敏感性较低，达不到检测要求。

因此，在本领域中如何进一步提高检测的灵敏度是解决问题的关键，期望开发出一种能够提高检测灵敏度并且不引入其他不确定因素的生物素化抗体以解决所述技术问题。

发明内容

针对现有技术的问题，本发明的目的在于提供一种生物素化抗体及其制备方法和应用。本发明生物素化抗体的制备方法可以使得制备得到的生物素化抗体应用于免疫检测时增强信号强度，提高检测的灵敏度，且不会引入其他不确定因素，对免疫检测试剂盒质量的提高有可预见的作用。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种生物素化抗体的制备方法，所述方法包括以下步骤：

(1)制备待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系；

(2)向待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系中加入生物素溶液，进行反应；

(3)将步骤(2)反应后的体系在缓冲液中进行渗析，而后进行纯化处理，得到所述生物素化抗体。

在本发明中利用所述制备方法可以制备出一种应用于免疫检测的生物素化抗体，抗体经过生物素化后利用生物素-链霉亲合素放大系统，与抗原抗体系统相比可以使连接强度增加100倍以上，显著增加免疫检测的灵敏度和信号强度，并且本方法操作简单，易于完成且不会引入其他不确定因素，对免疫检测试剂盒质量的提高有可预见的作用。

优选地，步骤(1)所述制备待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系的方法为：使用缓冲液将待生物素化的抗体蛋白稀释至0.5-2mg/mL，而后在缓冲液中渗析得到所述待生物素化的抗体蛋白的缓冲液体系。

优选地，所述缓冲液为碳酸盐缓冲液。

在本发明中，使用缓冲液将待生物素化的抗体蛋白稀释至0.5-2mg/mL，例如0.5mg/mL、0.6mg/mL、0.7mg/mL、0.8mg/mL、0.9mg/mL、1.0mg/mL、1.1mg/mL、1.2mg/mL、1.3mg/mL、1.4mg/mL、1.5mg/mL、1.6mg/mL、1.7mg/mL、1.8mg/mL、1.9mg/mL或2.0mg/mL，优选1mg/mL。

在本发明中，所述碳酸盐缓冲液的pH值为8.0-8.5，例如8.0、8.1、8.2、8.3、8.4或8.5。

在本发明中，所述碳酸盐缓冲液中溶质的浓度为0.02-0.2mol/L，例如0.02mol/L、0.04mol/L、0.06mol/L、0.08mol/L、0.1mol/L、0.12mol/L、0.14mol/L、0.16mol/L、0.18mol/L或0.2mol/L。