[发明专利]一种人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法及应用

说明书

本发明属于细胞因子技术领域，公开了一种人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法及应用，选用易于获取的脐带组织，经体外干细胞分离与扩大培养，得到纯度较高的干细胞；再将干细胞进行工厂化放大培养，收集细胞培养液，经培养液的浓缩、蛋白含量测定、质检，得到细胞因子。本发明采用此种工艺制备的细胞因子含有多种干细胞所分泌的细胞因子；可将稀释的细胞因子注入冻干粉，也可以直接适量涂于患处或面部(按照疗程指示使用)；按比例加入化妆品；在美容及皮肤修护领域使用，可修复表皮及基底层受损的皮肤细胞，达到皮肤美容的效果。

技术领域

本发明属于细胞因子技术领域，尤其涉及一种人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法及应用。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：

干细胞是一种具有多向分化潜能及无限自我更新复制能力的细胞，在一定条件下，可分化为特定的组织。干细胞在生长、增殖、分化过程中会向胞外分泌促进细胞生长及调控周围环境的细胞因子等活性物质。

间充质干细胞具有自我复制能力及多项分化的潜能，在体内或特定条件下可分化为功能性细胞，在增殖、分化过程中分泌多种生长因子，改善组织器官内部微环境，有效调节内分泌系统和荷尔蒙系统；还可促进胶原蛋白生成。

细胞因子具有多种功能，对促进成纤维细胞的代谢和胶原蛋白的形成发挥着重要功能。细胞因子能促进皮肤组织的生长繁殖，通过与细胞表面特异受体结合，调控皮肤上皮，内皮和基质细胞的分裂、繁殖和生长分化，促进细胞代谢，增强氧化作用；能促进与皮肤损伤有关细胞的迅速生长繁殖，并调节细胞间基质的合成、分泌及分解；能促进角质层细胞的再生，加速皮肤角质层和基质层的修复，促进人体皮肤细胞的生长；能增强皮肤细胞的蛋白质的合成和细胞代谢，具有延缓皮肤细胞衰老、促进表皮细胞的修复和生长作用，使皮肤光滑丰润。

将间充质干细胞用于医疗美容领域，已经成为近些年利用再生医学技术进行美容的研究热点。常见的形式有干细胞皮肤注射美容、干细胞培养液直接使用、干细胞静脉回输。

综上所述，现有技术存在的问题是：

(1)干细胞注射，对细胞的质量要求较高，且需要供体的细胞，注射的细胞不一定能完全成活；现有技术没有很好的解决；

(2)干细胞培养液直接使用，培养液中可能含有死细胞裂解的成分和少量血清成分。

(3)专利CN101461772A中，采用PBS培养4-24h，收集细胞因子。此方法中细胞已裂解死亡，细胞因子收集后，细胞不可以再继续传代培养，细胞裂解所释放的毒素也无法除去。

解决上述技术问题的难度和意义：

本发明的细胞因子可用于美容及皮肤修复领域，达到改善肤色、恢复皮肤年轻态的效果。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法及应用。

本发明是这样实现的，一种人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法，所述人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法选用易于获取的脐带组织，经体外干细胞分离与扩大培养，得到纯度较高的干细胞；再将干细胞进行工厂化放大培养，收集细胞培养液，经培养液的浓缩、蛋白含量测定、质检，得到细胞因子。

进一步，所述获取的脐带组织免疫源性最低、干细胞性能最强。

进一步，所述人脐带间充质干细胞细胞因子的制备方法，具体包括：

步骤一，人脐带间充质干细胞的原代分离与培养；

步骤二，人脐带间充质干细胞表面标志物的鉴定；