[发明专利]利用叶绿体标记鉴别玉米雄性不育S型胞质类型

权利要求书

1.用于鉴别玉米雄性不育S型胞质类型的分子标记，其特征在于，其由以下7个分子标记组成，所述7个分子标记的信息如下：

所述分子标记分别通过以下引物扩增得到：CPMSNP12，SEQ ID NO.50-52；CPMSNP37，SEQ ID NO.65-67；CPMSNP52，SEQ ID NO.74-76；CPMSNP60，SEQ ID NO.77-79；CPMSNP65，SEQ ID NO.80-82；CPMSNP66，SEQ ID NO.83-85；CPMSNP96，SEQ ID NO.89-91。

2.权利要求1所述分子标记在鉴定玉米S型胞质雄性不育系配制的杂交种中的应用。

3.权利要求1所述分子标记在鉴定S型胞质雄性不育玉米材料中的应用。

4.权利要求1所述分子标记在玉米分子标记辅助育种中的应用。

5.权利要求1所述分子标记在玉米种质资源鉴定中的应用。

6.根据权利要求2-5任一所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测玉米样品的DNA；

2)以步骤1)提取的DNA为模板，根据所述分子标记，基于KASP检测平台技术分别设计引物，进行PCR扩增；所述分子标记分别通过以下引物扩增得到：CPMSNP12，SEQ ID NO.50-52；CPMSNP37，SEQ ID NO.65-67；CPMSNP52，SEQ ID NO.74-76；CPMSNP60，SEQ ID NO.77-79；CPMSNP65，SEQ ID NO.80-82；CPMSNP66，SEQ ID NO.83-85；CPMSNP96，SEQ ID NO.89-91；

3)采用荧光检测仪分析PCR产物。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤2)PCR扩增程序为：94℃15min；94℃20s，61℃1min，循环10次，每个循环降低0.6℃；94℃20s，58℃1min，循环30次。

8.权利要求1所述分子标记在鉴定S型胞质雄性不育玉米材料纯度中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测玉米样品的DNA；

2)以步骤1)提取的DNA为模板，根据权利要求1所述分子标记，基于KASP检测平台技术分别设计引物，进行PCR扩增；所述分子标记分别通过以下引物扩增得到：CPMSNP12，SEQ IDNO.50-52；CPMSNP37，SEQ ID NO.65-67；CPMSNP52，SEQ ID NO.74-76；CPMSNP60，SEQ IDNO.77-79；CPMSNP65，SEQ ID NO.80-82；CPMSNP66，SEQ ID NO.83-85；CPMSNP96，SEQ IDNO.89-91；

3)采用荧光检测仪分析PCR产物；

4)若PCR产物对应位点与权利要求1述及的玉米S型细胞质雄性不育材料等位基因相同则为S型不育单株，如果为另一个等位基因则不属于S型不育单株；每个位点均进行纯度计算，计算方法为：(S型不育单株数目/检测的总单株数目)×100％。