[发明专利]检测多种氨基酸和酰基肉碱、甲基丙二酸的方法和试剂盒

权利要求书

1.串联质谱法检测用试剂盒，包含提取液和流动相，并任选地包含质控标准品、目标分析物的同位素标准品和衍生化试剂中的一种或多种，其中所述提取液为浓度为85-95体积％的甲醇水溶液，所述流动相为包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的体积比为70-90:15-25:0.15-0.25。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述衍生化试剂为乙酰氯和正丁醇混合物，优选地，乙酰氯与正丁醇体积比为1:8.5-9.2。

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其中所述目标分析物选自氨基酸、酰基肉碱、甲基丙二酸、以及上述的任意组合。

4.用串联质谱法检测样品中目标分析物的方法，包括以下步骤：

(a)用提取液稀释所述目标分析物的同位素标准品，以制备提取工作液，其中所述提取液为浓度为85-95体积％的甲醇水溶液；

(b)用所述提取工作液处理所述样品，并进行干燥；

(c)用衍生化试剂处理来自步骤(b)的提取处理后的样品，并进行干燥；

(d)用流动相复溶来自步骤(c)的衍生化处理后的样品，其中所述流动相为包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的体积比为70-90:15-25:0.15-0.25；以及

(e)在串联质谱仪检测来自步骤(d)的复溶后的样品。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述衍生化试剂为乙酰氯和正丁醇混合物，优选地，乙酰氯与正丁醇体积比为1:8.5-9.2。

6.如权利要求4或5所述的方法，其中所述目标分析物选自氨基酸、酰基肉碱、甲基丙二酸、以及上述的任意组合。

7.如权利要求4-6中任一项所述的方法，还包括在步骤(b)-(e)中与所述样品平行地处理和检测质控标准品。

8.下述物质在制备用于遗传代谢病诊断的串联质谱法检测用试剂盒中的用途：

提取液，所述提取液为浓度为85-95体积％的甲醇水溶液；

流动相，所述流动相为包含水、乙腈和五氟丙酸的混合物，其中水、乙腈和五氟丙酸的体积比为70-90:15-25:0.15-0.25；和

任选的质控标准品、目标分析物的同位素标准品和衍生化试剂中的一种或多种。

9.如权利要求8所述的用途，其中所述遗传代谢病选自甲基丙二酸血症、高苯丙氨酸血症、高苯丙氨酸血症、鸟胺酸氨甲酰基转移酶缺乏症、丙酸血症、短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(SCAD)、瓜氨酸血症、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLAD)、酪氨酸血症、酮硫解酶缺乏症、戊二酸血症I型(GA-I)、异戊酸血症和高甲硫氨酸血症。

10.如权利要求8或9所述的用途，其中所述衍生化试剂为乙酰氯和正丁醇混合物，优选地，体积比为1：9；和/或

其中所述目标分析物选自氨基酸、酰基肉碱、甲基丙二酸、以及上述的任意组合。