[发明专利]基于KASP技术的玉米雄性不育胞质类型的鉴定方法

权利要求书

1.基于KASP技术开发的用于鉴定玉米C型胞质不育材料的分子标记的引物组合，其特征在于，用于鉴定玉米C型胞质不育材料的分子标记包括以下9个SNP标记和1个InDel标记，它们的信息如下：

2.基于KASP技术的玉米C型胞质不育材料的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测玉米样品的DNA；

2)KASP反应：向步骤1)提取的DNA模板中加入KASP Primer mix和KASP ROX standardreaction mix，进行PCR扩增；

3)采用荧光检测仪分析PCR产物；

所述KASP Primer mix为权利要求1所述的各KASP引物中上游引物5’端分别修饰不同荧光标签序列后，与下游通用引物形成的混合物；

其中，所述荧光标签序列为：5’-FAM-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’；

5’-HEX-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2)中PCR反应体系为：DNA模板1.5μL，KASP ROX standard reaction mix 0.5μL，KASP Primer mix 0.014μL，ddH₂O 0.5μL；所述KASP Primer mix中各引物的浓度为100μM；

PCR反应程序为：94℃15min；94℃20s，61-55℃1min，每个循环降低0.6℃，10个循环；94℃20s，58℃1min，30个循环。

4.含有权利要求1所述引物组合的检测试剂或试剂盒。

5.权利要求1所述引物组合或权利要求4所述检测试剂或试剂盒在玉米样品检测、玉米分子标记辅助育种中的应用；

所述玉米为玉米C型胞质不育材料。