[发明专利]一种基于大肠埃希氏菌快速筛选电子烟液的方法

说明书

本发明涉及一种基于大肠埃希氏菌快速筛选电子烟液的方法，属于电子烟研发技术领域。本发明将体外抑菌检测法和烟液调配技术组合，首先制备含不同植物提取物的烟液，采用微量稀释抑菌检测技术对所制备的烟液进行筛选，获得具有抑菌活性的烟液。本发明方法的特点在于：采用大肠埃希氏菌作为测试菌株，确定了适用于电子烟液的微量稀释抑菌检测体系，筛选检测效率高，可在较短时间内获得具抑菌活性的烟液配方，为安全、高品质电子烟液的获得提供有效技术支持。

技术领域

本发明涉及一种基于大肠埃希氏菌快速筛选电子烟液的方法，属于电子烟研发技术领域。

背景技术

电子烟，又称为电雾化卷烟，是一种外观、生理感受、心理感知、吸食方式等方面接近传统卷烟的新型烟草制品。电子烟通过电子加热手段向呼吸系统传送尼古丁，主要由烟杆、雾化器、吸嘴、充电器及烟弹等组成。烟液是电子烟产品的主要吸食原料，在低温受热下挥发产生烟雾，其配方也是电子烟的核心技术之一。但是，烟液烟雾的香气味与传统卷烟味道差别较大，消费者接受度不高，因此烟液配方需要改进，以满足消费者的需求。例如发明专利CN104397871B公开了一种含茶叶提取物的电子烟烟液配方，添加了茶叶提取物，提升了抽吸香烟的烟气、丰富烟香、尽可能减少吸烟危害，还起到生津保润，减少刺激和提高电子烟质量的作用。发明专利CN105876867A公开了一种含杜仲提取物的电子烟液配方，除了具有较好的香气，口感好，还具有抗癌防癌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血压、消炎抑菌、保胆利肝、镇静催眠、补肾强身、止痛安胎、减肥和防止老年痴呆等作用。因此，天然的植物提取物是电子烟液的优质配方原料。

此外，电子烟是一种反复使用的电子产品，长时间使用容易滋生细菌，研发具有抑菌活性的烟液成为电子烟研发的重要内容。细菌的种类非常繁多，对人体健康的影响和作用差异巨大，有些作用不明显，有些具有益生作用，被称为益生菌，有些具有危害作用，被称为致病菌。大量研究表明，同一活性成分对不同细菌的抑菌作用差异显著，因此针对不同测试菌株筛选抑菌活性成分非常重要。目前尚没有针对不同细菌筛选电子烟油抑菌活性的公开报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之不足，提供一种基于大肠埃希氏菌快速筛选电子烟液的方法，将体外抑菌检测法和烟液调配技术组合，先制备含不同植物提取物的烟液，采用微量稀释抑菌检测技术对所制备的烟液进行筛选，获得具有抑菌活性的烟液，为安全、高品质电子烟液的获得提供有效技术支持。

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，俗称大肠杆菌，是埃希氏菌属的代表菌，是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，一般情况下多数不致病，在一定条件下可引起腹泻等疾病。本发明基于大肠埃希氏菌，将体外抑菌检测法和烟液调配技术组合，首先制备含不同植物提取物的烟液，采用微量稀释抑菌检测技术对所制备的烟液进行筛选，获得具有较好抑菌活性的烟液，为安全、高品质电子烟液的获得提供有效技术支持。

本发明的技术方案为：一种基于大肠埃希氏菌快速筛选电子烟液的方法包括以下步骤：

(1)受试电子烟液样品的制备

称取基础电子烟液样品10.0g，根据感官评吸效果确定植物提取物的添加量，添加量范围0.01～0.50g，对照组为基础电子烟液。

(2)抑菌活性的测定

1)菌株活化培养：自液氮罐中取出冻存的菌株，置于37℃水浴中快速融解得到复苏菌液；将复苏菌液以1.0％(v/v)的比例接种于灭菌营养肉汤培养基中，置于恒温水浴摇床中36℃，120rpm培养16～20h，获得第1次活化菌液；再将第1次活化菌液以1.0％(v/v)的比例接种于灭菌营养肉汤培养基中，然后置于恒温水浴摇床中36℃，120rpm培养16～20h，得到第2次活化菌液；