[发明专利]一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法在审
申请号: | 201810119626.2 | 申请日: | 2018-02-06 |
公开(公告)号: | CN108456643A | 公开(公告)日: | 2018-08-28 |
发明(设计)人: | 周建波 | 申请(专利权)人: | 兰溪市沉默生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/02 | 分类号: | C12N1/02;C12N1/00 |
代理公司: | 北京华识知识产权代理有限公司 11530 | 代理人: | 赵永强 |
地址: | 321100 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复合菌剂 玉米秸秆 制备 培养基 纤维素 玉米杆 降解 氢氧化钠溶液 玉米秸秆饲料 混合复合菌 秸秆预处理 保藏 半纤维素 高效降解 农田土壤 清水浸泡 剪切 蛋白胨 调节剂 肥料化 高效率 降解剂 降解率 木质素 能力强 培养物 烘干 滤纸 取样 酵母 筛选 分解 玉米 种植 | ||
1.一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:
秸秆预处理:取收割成熟的干玉米秸秆,剪成4-6cm长的小段,然后纵向切丝,放入容器中用氢氧化钠溶液浸泡,再用清水浸泡1-2天,用自来水反复冲洗至洗涤液为中性,70-80℃烘干备用;
制备培养基:蛋白胨纤维素培养基的组成:蛋白胨、纤维素、NaCl、CaCO3、酵母、调节剂,纤维素为新华滤纸和碱液处理过的玉米秸秆;上述所有成分溶解在1L水中,pH自然,灭菌后即得培养基;
筛选:从常年种植玉米的农田土壤中取样,将5.0-5.5g土壤样品加入三角瓶中,加入100-110mL配置好的培养基和1g处理过的玉米秸秆,放入滤纸作为分解的外观指标,在28-30℃静止培养;待滤纸分解后,取5-6mL培养液加入到同样的培养基中,一直继代培养,淘汰分解力弱的,留下分解能力强的培养物培养,选取分解能力强的复合菌群,混合后继续培养,得到分解能力强的复合菌剂保藏处理。
2.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述秸秆预处理步骤中,氢氧化钠溶液的质量分数为1.5-3.4%,浸泡时间为48-96小时。
3.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述制备培养基步骤中,蛋白胨纤维素培养基的组成及其重量为:蛋白胨5.0-10.0g、纤维素5.0-6.0g、NaCl3.0-5.0g、CaCO32.0-2.2g、酵母1.0-1.5g、调节剂0.02-0.03g。
4.根据权利要求1或3所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述制备培养基步骤中的调节剂是重量比为8.9-9.05:1的乙酰柠檬酸三丁酯和(2R,4R)-戊二醇。
5.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述制备培养基步骤中,培养基灭菌条件为:温度121-122℃,压强1.0-1.5×105Pa,灭菌时间为25-30分钟。
6.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述筛选步骤中,培养10-15代后选取3-5组分解能力强的复合菌群。
7.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述筛选步骤中,复合菌群混合后继续培养4-5代,得到分解能力强的复合菌剂。
8.根据权利要求1所述的一种降解玉米杆的复合菌剂的制备方法,其特征在于:所述筛选步骤中,复合菌剂的保藏pH值为8.1-8.2,含水量为1.40-1.42%,保藏湿度为9-10%,保藏温度为13-15℃。
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