[发明专利]一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物

权利要求书

1.一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：包括：

1）取皱瘤海鞘，用乙酸乙酯反复浸提若干次直至浸提液呈无色后，合并浸提液，浓缩得到粗提物；

2）步骤1）得到的粗提物用甲醇溶解，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水=0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述用甲醇溶解的粗提物，用上相溶解为浓度480～520 mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4 mL/min，正接正转，转速800～900 r/min；温度34～36℃；检测波长：205～215 nm；收集68～125 min出峰对应的组份；

3）取步骤2）中68～125 min出峰对应的组份，用反相液相色谱分离，固定相：YMC-Triart C18；流动相：甲醇-水混合液；梯度洗脱1.5～2.5 h，流动相中甲醇浓度从4～6%均匀递增到100%；流速55～65 mL/min；柱温24～26 ℃；检测波长195～205 nm、250～260 nm、305～315 nm；

4）收集步骤3）中流动相中甲醇浓度为65%～100%时对应的组份，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水=1.8～2.2:0.8～1.2:0.8～1.2:2.8～3.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述的步骤3）中甲醇浓度65%～100%时对应的组份，用上相溶解为浓度480～520 mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900 r/min；温度34～36 ℃；收集40～50 min出峰对应的组份；

5）取步骤4）中收集的40～50 min出峰对应的组份，用甲醇配制成95～105 mg/mL，用高效液相色谱分离：固定相：YMC-Triart C18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55%的甲醇-水混合液，再加入0.08～0.12%的甲酸；流速：1.5～2.5 mL/min；柱温24～26 ℃；检测波长：195～205 nm和205～215 nm；收集115～130 min出峰对应的组份；

6）取步骤5）中收集的115～130 min出峰对应的组份，用45～55%甲醇配制成48～52mg/mL，用高效液相色谱纯化：固定相：YMC-Triart C18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55%的甲醇-水混合液，再加入0.08～0.12%的甲酸；流速：1.5～2.5 mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205 nm和205～215 nm；收集200～210 min的出峰对应的组份，得到所述癸二烯醇类化合物，为（E,E）癸-3,7-二烯-1-醇。

2.根据权利要求1上述的从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：所述步骤2）中，以上相为固定相，以下相为流动相，用35～45 mL/min的流速将固定相泵满，调节转速为800～900 r/min，温度34～36 ℃，以2～4 mL/min的流速向柱中泵入流动相，当流动相从主机出口稳定流出时，证明体系已经达到流体动力学平衡；随后再用于粗提物的高速逆流液相色谱分离。

3.根据权利要求1上述的从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：所述步骤2）中，高速逆流液相色谱采用TBE-300B。

4.根据权利要求1上述的从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：所述步骤3）中，反相液相色谱采用PURIFLASH® 4250，带有DAC-50动态轴向压缩柱系统；所述固定相YMC-Triart C18的规格为50×250 mm，粒径10 μm。

5.根据权利要求1上述的从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：所述步骤4）中，以上相为固定相，以下相为流动相，用40 mL/min的流速将固定相泵满，调节转速为800～900 r/min，温度34～36 ℃，以2～4 mL/min的流速向柱中泵入流动相，当流动相从主机出口稳定流出时，证明体系已经达到流体动力学平衡；随后再用于步骤3）中流动相中甲醇浓度为65%～100%时对应的组份的高速逆流液相色谱分离。