[发明专利]一种孕妇子痫前期的诊断试剂盒及诊断方法

权利要求书

1.一种孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒检测Foxp3的基因多态性位点，包括Foxp3-6054扩增组和Foxp3-3279扩增组，其中Foxp3-6054扩增组包括扩增如序列表SEQ ID NO：1所示Foxp3-6054片段的特异性引物，Foxp3-3279扩增组包括扩增如序列表SEQ ID NO：2所示Foxp3-3279片段的特异性引物。

2.根据权利要求1所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于，Foxp3-6054的特异性引物的基因序列如序列表SEQ ID NO：3和序列表SEQ ID NO：4所示。

3.根据权利要求1所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于，Foxp3-3279的特异性引物的基因序列如序列表SEQ ID NO：5和序列表SEQ ID NO：6所示。

4.根据权利要求1所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于：Foxp3-6054扩增组和Foxp3-3279扩增组均包括特异性引物、DNA聚合酶、dNTPs和扩增缓冲液。

5.根据权利要求1所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于：Foxp3-6054扩增组和Foxp3-3279扩增组还包括DMSO和/或牛血清蛋白。

6.根据权利要求4所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒，其特征在于：DNA聚合酶为热启动Taq酶。

7.一种采用根据权利要求1～6任一项所述的孕妇子痫前期的诊断试剂盒的诊断方法，其特征在于：所述扩增方法在同一体系中扩增Foxp3-6054模板和Foxp3-3279模板，使两段DNA模板变性后在不同温度下退火，其中Foxp3-6054模板先退火，退火完成后Foxp3-3279模板再退火，退火完成后在同一温度下同时延伸。

8.根据权利要求7所述的孕妇子痫前期的诊断方法，其特征在于，扩增条件具体为：初始变性94℃保持5min，94℃变性30s，61℃退火2min，再降温至50℃，退火2min，72℃延伸1min，30个循环。

9.根据权利要求7所述的孕妇子痫前期的诊断方法，其特征在于，本扩增方法中的扩增体系具体为25μL体系，其中包括：

模板DNA 150ng；

1×PCR buffer；

Cheetah Taq热启动酶1U；

dNTPs各200μM；

Foxp3-6054正向和反向引物各0.4μmol；以及

Foxp3-3279正向和反向引物各0.4μmol。

10.一种孕妇子痫前期诊断试剂盒在孕妇子痫前期诊断中的应用，其特征在于：所述试剂盒用于同时扩增Foxp3基因的Foxp3-6054位点和Foxp3-3279位点。