[发明专利]一种基于仿生消化评价饲料玉米赤霉烯酮降解效率的方法

权利要求书

1.一种基于仿生消化评价饲料玉米赤霉烯酮降解效率的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)饲料用仿生消化法进行消化，并测定其干物质消化率；所述玉米赤霉烯酮为发霉饲料产生；

(2)将降解玉米赤霉烯酮的微生物和相应的培养基加到上述消化后饲料中作为试验组，并以未加微生物和培养基的上述消化后饲料作为对照组，将试验组和对照组置于培养箱中进行降解培养；

(3)培养结束后，测定试验组和对照组中玉米赤霉烯酮的含量，计算玉米赤霉烯酮的降解率；

玉米赤霉烯酮的降解率＝[(对照组中玉米赤霉烯酮含量-试验组中玉米赤霉烯酮含量)/对照组中玉米赤霉烯酮含量×100％]/干物质消化率；

所述仿生消化法的具体步骤为：

a)口腔模拟：将饲料加入缓冲溶液中，混合均匀，调节pH到6.8，然后加入淀粉酶溶液，得到口腔模拟体系，37℃-39℃，150r/min消化1-3h；

b)胃模拟：消化结束后，向上述消化后的口腔模拟体系中加入HCl溶液，混合均匀，并调节pH至2.0，然后加入酸性外源酶混悬液，得到胃模拟体系，37℃-39℃，150r/min消化4-9h；

c)小肠模拟：向消化后的胃模拟体系中加入NaOH溶液，并调节pH至6.8，然后加入肠道外源酶混悬液，得到肠道模拟体系，37℃-39℃，150r/min消化16-20h。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述仿生消化法中饲料、缓冲溶液、淀粉酶溶液、HCl溶液、酸性外源酶混悬液、NaOH溶液、肠道外源酶混悬液的加入量比值为：2g：20-30mL：1-1.5mL：8-12mL：1-1.5mL：3-7mL：2-3mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述缓冲溶液为0.1M、pH6.0的PBS缓冲溶液；所述HCl溶液为0.2M的HCl溶液；所述NaOH溶液为0.6M的NaOH溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述淀粉酶溶液浓度为4-10mg/mL；所述酸性外源酶混悬液浓度为15-30mg/mL；所述肠道外源酶混悬液包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶；其中，蛋白酶:淀粉酶:脂肪酶的质量比＝(1～5):1:1，蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶三者的总浓度为5-15mg/mL；蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶三者的总质量与果胶酶、纤维素酶、甘露聚糖酶和木聚糖酶酶四者的总质量之比为(5-12):1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述降解培养的条件为：37℃避光培养48h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述降解玉米赤霉烯酮的微生物为枯草芽孢杆菌。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述试验组和对照组中玉米赤霉烯酮的含量采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定。