[发明专利]一种联合检测F-T3、F-T4和TSH的芯片及其制备方法在审
申请号: | 201810128094.9 | 申请日: | 2018-02-08 |
公开(公告)号: | CN108387750A | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 成舜;施启尧;丁俊杰;泮锋纲 | 申请(专利权)人: | 江苏三联生物工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/78 | 分类号: | G01N33/78;G01N33/68 |
代理公司: | 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 | 代理人: | 聂启新 |
地址: | 214135 江苏省无锡市新*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗体溶液 联合检测 芯片 预处理 蛋白芯片 灵敏度 信号强 玻片 点样 检出 制备 封闭 | ||
1.一种联合检测F-T3、F-T4和TSH的芯片,其特征在于所述芯片通过如下步骤制得:
(1)黑玻片预处理;
(2)点样抗体溶液;
(3)封闭抗体溶液,制得所述蛋白芯片。
2.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(1)中所述黑玻片预处理的方法为:
①将黑玻片置于含有NaOH的玻片预处理液中浸泡16~24h,之后采用纯化水清洗2~8次;
②将黑玻片置于质量浓度为0.05~1wt%的硅烷水溶液中浸泡20~60min;
③将浸泡好的黑玻片放入烘箱中,于100~180℃条件下烘烤0.2~0.6h。
3.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(2)中所述抗体溶液包括游离三碘甲状腺原氨酸抗体、游甲状腺素抗体和促甲状腺激素抗体溶液。
4.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(2)中所述点样的方法为机器自动化点样,在黑玻片上点成4×5的矩阵;每列为同一种抗体溶液形成的点。
5.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(3)中所述封闭过程为:将点样好的黑玻片没入封闭液中1~4h,之后取出黑玻片,并离心去除残余封闭液,制得所述蛋白芯片。
6.根据权利要求5所述的蛋白芯片,其特征在于所述封闭液为含有封闭蛋白的缓冲溶液;所述封闭蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白;所述缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液、HEPS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或多种。
7.一种权利要求1~6任一项所述蛋白芯片的应用,其特征在于将所述蛋白芯片制成试剂盒。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于所述试剂盒还包括标记有HRP酶的第二抗体溶液、检测液A和检测液B。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于所述检测液A含有1%过氧化氢,检测液B含有1%鲁米诺和2%Tris。
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