[发明专利]一种将抗体或其抗原结合片段共价结合至颗粒表面的方法

说明书

本申请涉及一种将抗体或其抗原结合片段共价结合至颗粒表面的方法。具体而言，本申请涉及一种表面结合有抗体的颗粒，所述颗粒的结构如下式所示：抗体‑桥连蛋白‑颗粒。这种结构有利于维持抗体的活性，同时桥连蛋白所形成的长臂有助于减小抗体的位阻效应，便于与抗原的结合。本申请所制备的颗粒及其试剂使得准确性和灵敏度得到了提升。

技术领域

本申请涉及临床检验领域。尤其涉及一种将抗体或其抗原结合片段共价结合至颗粒表面的方法。

背景技术

抗缪勒管激素(anti-Mullerian hormone，AMH)是转化生长因子β(TGF-β)超家族成员。AMH是由睾丸未成熟的Sertoli细胞及卵巢窦前卵泡和小窦卵泡的颗粒细胞所分泌的一种糖蛋白。卵巢内的小窦卵泡数量越多，AMH的浓度便越高；反之，当卵泡随着年龄及各种因素逐渐消耗，AMH浓度也会随之降低；接近绝经期时，AMH便渐趋于0。鉴于此，AMH可作为预测卵巢储备的标志物。

AMH检验的临床意义在于：

(1)卵巢储备功能评价：女性出生时，血清中AMH浓度水平很低，青春期后AMH浓度达到高峰，并在整个生育年龄维持在高水平，之后随着年龄及各种因素逐渐消耗，AMH浓度会随之降低，直到绝经后将无法测出。可见，AMH值会随着卵巢功能的变化呈起伏变化。AMH指数越高，说明卵子的库存量越大，生育能力自然就较强。AMH降低时，代表卵巢正在老化，表示女性生育力的衰退。通过检测AMH可更早更准确反映年龄相关卵巢储备功能的下降。

(2)多囊卵巢综合征(PCOS)：PCOS是人群中发生率最高的生殖内分泌紊乱疾病，但目前诊断方法并不准确。传统的超声下窦卵泡计算困难，受主观因素影响较大。临床研究发现，PCOS患者血清AMH水平高于正常水平2至3倍，血清AMH可以用来诊断PCOS并评估其疗效，其灵敏度67％，特异度92％。因此，AMH浓度是卵巢窦卵泡数目的精确反映，血清AMH水平取代超声下小窦状卵泡计数可作为PCOS诊断标准之一。

(3)卵巢功能早衰(POF)：POF患者血清AMH水平明显低于正常同龄女性，与绝经期妇女水平相当。而且由于AMH不仅由小窦卵泡产生，即使彩色超声检测不到的小卵泡同样可以分泌，且为非周期依赖性的，不参与下丘脑-垂体-性腺轴的负反馈调节。因此AMH有望成为早期预测POF发病的良好的临床指标。

(4)辅助生殖技术：AMH水平能够预测卵巢反应性，识别有卵巢过度刺激综合征风险的女性，可根据AMH数值来判断使用促排卵药物的用量。研究发现接受IVF/ICSI治疗的患者血清及卵泡液中AMH水平越高则受精率越高，AMH可能成为预测受精率的指标。除此之外，AMH预测OHSS优于年龄和BMI，发生OHSS患者的基础AMH较正常人高6倍，提示AMH可能提前预测OHSS。

(5)卵巢颗粒细胞瘤：因由于AMH仅由颗粒细胞表达，其表达水平由卵巢初级卵泡和窦前卵泡的颗粒细胞决定，这说明AMH可以作为卵巢颗粒细胞瘤的一个标记物。据报道76％至93％的卵巢颗粒细胞瘤中AMH表达均为阳性，且AMH与卵巢颗粒细胞瘤的肿瘤大小及分化程度具有独立相关性，并且对卵巢颗粒细胞瘤的复发有一定预测价值。

(6)预测绝经发生的年龄：AMH水平与绝经年龄密切相关，血清AMH水平在绝经前5年逐渐降低，故目前认为血清AMH可以预测绝经年龄。

(7)性别发育异常：可协助诊断患儿是否存在性腺发育异常、性早熟、隐睾等发育障碍疾病。如果血清AMH水平很低或检测不出，则高度提示无睾丸组织。研究显示，在隐睾症患者中，有50％患者血清AMH水平正常，且隐睾症患者血清AMH水平明显低于单睾丸患者。

(8)相关疾病辅助诊治：血清AMH水平也与一系列自身免疫性疾病相关，因为该类患者的卵巢功能往往也受到损伤。如自身免疫性甲状腺疾病、系统性红斑狼疮和克罗恩病等。除此之外，AMH的检测可用于预测和评估放疗、化疗，以及卵巢手术等治疗对患者卵巢功能的影响，指导治疗方案的选择。