[发明专利]衍生化多种有机酸测定试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种衍生化多种有机酸测定试剂盒，其特征在于，包括：校正品、内标物质控品混标，肟化试剂A，肟化试剂B，萃取液，衍生化试剂，空白试剂，酸碱pH试纸，干燥剂，玻璃内插管；

所述校正品采用C9-C28的正构烷烃混合标准品稀释液，

所述内标物质控品混标包括：纯乙酸乙酯，十七烷酸，2-苯基-3-羟基丙酸和二十四烷，其中纯乙酸乙酯为稀释液，

所述衍生化试剂包括N，O-双(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺与三甲基氯硅烷；

所述N，O-双(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺与三甲基氯硅烷的体积比为(90—99)：(1—10)。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述N，O-双(三甲基硅烷基)-2，2，2-三氟乙酰胺与三甲基氯硅烷的体积比为99:1。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述正构烷烃标准品浓度为8-12mg/L。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述肟化试剂A为盐酸羟胺，所述盐酸羟胺的含量为4％-6％；所述盐酸羟胺用于参与肟化反应。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述盐酸羟胺的含量为5％。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述肟化试剂B为盐酸，所述盐酸含量为5-10N，所述盐酸用于调节肟化反应液的pH值。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述盐酸含量为6N。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述空白试剂为乙酸乙酯，所述乙酸乙酯用于清洗进样口残留的有机物。

9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述干燥剂为无水氯化钙或氧化钙，所述干燥剂用于提供一个相对的干燥的环境。

10.一种如权利要求1-9任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)添加内标/质控品操作:将每个样本分别加入40ul内标品、质控品混合液；

(b)肟化反应操作：根据样本尿肌酐浓度差异，分别用超纯水定容总体积到2ml，振荡30s充分混匀；

加入1ml 5％盐酸羟铵，塑料离心管盖密封，置于涡旋振荡器上，振荡60s充分混匀，室温下(20-26℃)反应20分钟；

加入550ul盐酸(6N)密封、避光保存，置于涡旋振荡器上，振荡60s充分混匀，用广泛pH试纸检测，对比观察比色卡，呈玫红色，pH＝1-4；

(c)萃取操作：每个样本加入3ml乙酸乙酯，振荡60s混匀，样本置于台式低速离心机中离心，设置离心转速为4000r/min，离心时间5min，将上清液转移至备用10mL离心管中；

重复上述离心萃取操作一次；

(d)氮气吹干：在60℃条件下，氮吹30min；

(e)硅烷化反应：从氮吹仪上取出样本，加入100ul BSTFA:TMCS(99:1)硅烷化试剂，在电热恒温培养箱中70℃反应30分钟；

(f)转移上机：取出样本冷却至室温，转移样本至1.5ml进样瓶中的玻璃内插管中，放置自动进样器托盘，在自动进样器托盘1号位放入空白试剂进样瓶，2号位放入校正品，上机分析；

其中，GC部分条件为：进样方式采用分流模式；分流比为10:1；进样口温度为280℃；升温程序为100℃保持4分钟，以4℃/分钟速率升至280℃，保持11分钟；流量控制方式采用恒线速度；

MS部分条件为：离子源温度为200℃；接口温度为280℃；采样方式为Scan；间隔时间为0.50s；扫描速度为1000；开始m/z为50；结束m/z为500。