[发明专利]灵芝活性多糖的提取方法

说明书

本发明公开了灵芝活性多糖的提取方法，其具体步骤为：将灵芝子实体烘干，粉碎，用石油醚脱脂得脱脂灵芝粉；向脱脂灵芝粉中加水，超声提取后离心，上清液浓缩，加入离子液体‑无机盐双水相体系中，振荡得混合体系，静置分相，将下相装入透析袋中透析得脱蛋白多糖溶液；将脱蛋白多糖溶液中加入D392阴离子交换树脂、脂肪酸甲脂和三乙胺，震荡脱色，过滤，浓缩；将脱色得到的浓缩液中加入乙醇溶液，混合均匀，沉淀过夜，离心，干燥，即得灵芝多糖。有益效果为：本发明灵芝活性多糖的提取方法简单可行，多糖的提取效率、得率和纯度均较高，脱色率高，提取成本低。

技术领域

本发明涉及多糖提取技术领域，尤其是涉及灵芝活性多糖的提取方法。

背景技术

灵芝（Ganoderma lucidum）属于担子菌纲，多孔菌科，灵芝属真菌，素“仙草、瑞草”之美誉，有吉祥如意、尽除百病的含义，赋予灵芝仙丹妙药的美称。在中国、韩国和日本等国家，作为民间药方延年益寿和滋补身体已经有上千年的历史。在我国，《本草纲目》，《神农本草经》等名著中均有记载，称其“益心气”、“疗虚”、“利关节”、“好颜色”等功效。一般所指的灵芝是其子实体。灵芝子实体其外形呈伞状近圆形，是由菌盖和菌柄构成，是灵芝繁殖器官。灵芝的品质与地域、温度、气候等有着密切的关系，导致灵芝的质量品质良莠不齐，科学有效的方法来检测和控制灵芝相关产品质量成为当今功能食品和药品产业发展中急需解决的课题，而高效的提取方法是其前提。灵芝作为一种药食两用真菌，受到来自国内外生物化学和药理学等学科研究学者的广泛关注。按照现代中药理念，灵芝预防和治疗疾病表现在以下三个方面，其一，灵芝毒副性小；其二，保健治疗时作用多个器官；其三，改善和提高器官的正常功能。随着生物技术的发展，许多学者对研究灵芝的生物活性组分和灵芝相关产物非常关注。现代研究证明，灵芝主要生物活性组分包括：多糖、三萜类、蛋白质、氨基酸、甾醇、矿物质等。

多糖（polysaaccharide）是一类由10个以上单糖通过糖苷键聚合而成天然高分子化合物，通常是由醛糖或酮糖组成，具有广泛的生物活性，是维持生命活动的基本物质之一。多糖与脂类、蛋白质形成的脂多糖、糖蛋白在细胞与细胞信息交流、以及蛋白质的加工和转移以及免疫系统分子识别方面起着重要的作用。根据来源不同，多糖分为三种，分别是植物多糖，动物多糖，微生物多糖，而微生物多糖是近年来研究的重心。灵芝多糖是一种由三股单糖链组成且呈螺旋状的立体构型物，其构型与RNA、DNA相似，其分子量从数百到数十万。灵芝多糖作为灵芝的主要生物活性组分，现代药理学和临床试验证实灵芝多糖在预防和治疗多种疾病中扮演重要角色，具有抗肿瘤、免疫调节、抗辐射、抗菌、抗氧化等多种药理作用，近来越来越多如灵芝胶囊、灵芝口服液等灵芝多糖相关产品的出现，推动着灵芝产业的飞速发展。

现有技术如授权公告号为CN103073651B的中国发明专利，公开了一种灵芝多糖方法及其应用，采用超声波结合酶法提取灵芝多糖，灵芝粉碎后，通过提取、超滤、浓缩和乙醇沉淀分离获得灵芝多糖。灵芝多糖提取率为3.14-4.21%，分子量在10000道尔顿以下，呈浅棕色，其提取分离方法简单，适宜于工业化生产。所得灵芝多糖具有较强的抗氧化活性和抗癌活性。在DPPH·自由基体系中，灵芝多糖的IC50为0.28-0.43mg/mL，ORAC值可达1207.66-1777.90μmolTrolox/g。灵芝多糖浓度为2mg/ml时，对人肺癌细胞A549的抑制率可达53.04-68.37%，可以用于制备抗癌药物。但是该灵芝多糖的提取率和纯度均较低，且未经脱色处理。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备方法简单可行，多糖的提取效率、得率和纯度均较高，脱色率高，提取成本低的灵芝活性多糖的提取方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

灵芝活性多糖的提取方法，包括原料预处理、灵芝粗多糖提取液制备、脱蛋白、脱色、醇沉，其具体步骤为：