[发明专利]新型亲和嗜硫硅球色谱材料及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及色谱材料，具体地，涉及一种新型亲和嗜硫硅球色谱材料及其制备方法和应用，其中，该制备方法包括：在强碱存在下，将如式Ⅰ所示的磺酰胺(SFA)和环氧基团修饰的硅球于第一溶剂中进行共聚反应，以制得共聚材料；其中所述环氧基团为该新型亲和嗜硫硅球色谱材料机械性能强、易于储存，分散性好，并且能够对含二硫键化合物具有良好的特异性富集与分离能力，不仅如此，本发明的制备方法步骤简单，原料易得，反应过程可控，非常利于推广应用。

技术领域

本发明涉及色谱材料，具体地，涉及一种新型亲和嗜硫硅球色谱材料及其制备方法和应用。

背景技术

蛋白质中的二硫键即S-S键是肽链内或肽链间两个半胱氨酸的巯基氧化而成的键。二硫键能够让蛋白质中的肽链变得更加紧密，为维持蛋白质的高级结构，天然构象和生物活性提供了重要的基础。真核生物内的二硫键蛋白普遍存在，二硫键可在构象上固定多肽链的骨架或改善其热动力学稳定性，以抵抗高温、强酸、强碱等伤害。因此，二硫键蛋白常被分泌到细胞外或锚定于细胞膜，它们适于作为治疗药物(如胰岛素、抗体)或制药产业的靶标蛋白。在生命科学领域含有二硫键的生物分子分布非常广泛，如激素、酶、免疫球蛋白、血浆、抑制剂和毒液等，大部分已成为疾病诊断的重要标志物。但是这些样品组成复杂，丰度低，检测难度大。因此，采用合适的方法对其进行富集、浓缩、纯化等前处理，能够减少样品的复杂性，提高检测灵敏度，消除干扰。

亲和色谱的用途非常广泛(参见《Journal of Biological Chemistry》1970年第245期第3059-3065页)，可用来分离纯化细胞提取物中核酸、蛋白、血浆中抗体、重组蛋白等。嗜硫色谱法就是一类亲和色谱，可有效的富集、浓缩与纯化含二硫键的化合物。嗜硫色谱发展最早于1985年，Porath(参见《FEBS letters》1985年第185期第306-310页)。在2004年，Yannick等(参见《Journal of Chromatography B》2004年第808期第51-56页)利用二乙烯基砜在空纤维膜上修饰砜-硫醚基团，成功在复杂体系中富集纯化了含二硫键的IgG。在2005年，Lakhiar等(参见《Journal of Chromatography B》2005年第818期第53-59页)在硅球引入嗜硫基团与乙酰基神经氨酸，对老鼠腹水中的抗体的进行了有效的富集与纯化。

优质的色谱分离材料应该具有机械强度高，表面易改性等特点。然而，现有的这些嗜硫色谱材料机械强度小，制作成本高，不易储存，为了改善这些不足，本发明将嗜硫试剂引入到二氧化硅微球表面，结合硅球色谱材料机械性能好，易储存的优点，提供一种新型亲和嗜硫硅球色谱材料的制备方法并考察其应用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有嗜硫色谱材料机械强度小，制作成本高，不易储存的缺点，而提供一种新型亲和嗜硫硅球色谱材料及其制备方法和应用，该新型亲和嗜硫硅球色谱材料机械性能强、易于储存，分散性好，并且能够对含二硫键化合物具有良好的特异性富集与分离能力，不仅如此，本发明的制备方法步骤简单，原料易得，反应过程可控，非常利于推广应用。

为了实现上述目的，本发明提供了新型亲和嗜硫硅球色谱材料的制备方法，所述制备方法包括：在强碱存在下，将如式Ⅰ所示的磺酰胺(SFA)和环氧基团修饰的硅球于第一溶剂中进行共聚反应，以制得共聚材料；其中所述环氧基团为

本发明还提供一种根据前文所述的制备方法制备得到的新型亲和嗜硫硅球色谱材料。

不仅如此，本发明还提供一种根据前文所述的新型亲和嗜硫硅球色谱材料在对含二硫键化合物进行特异性的富集与分离中的应用。