[发明专利]一种樱桃苗木的培育方法

说明书

本发明公开了一种樱桃苗木的培育方法，以樱桃植株上切取的刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽为外植体进行植物组织培养，得到无毒，品种优良的樱桃苗木。有益效果为：本发明配置了改良1/2MS培养基作为无根苗生根培养基。1/2MS培养基中各成分有耦合作用，可有效提高多酚氧化酶（PPO）的活性，提高催化IAA与酚类物质的缩合反应速率，提高“IAA－酚酸复合物”的生成量，促进不定根形成，长出的根呈白色粗壮型，对水分和矿物质的吸收效率高。最后得到的樱桃苗木不带病毒，并很好的保留了母本的优良品种。

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体是一种樱桃苗木的培育方法。

背景技术

果树由于长期进行营养繁殖，使各类病毒病不断扩散蔓延， 并日趋严重，造成树体生长不良、产量下降、品质变劣、树体异常，给生产带来巨大的经济损失。从20 世纪80 年代开始， 我国大量从国外引进欧洲甜樱桃（Prunus avium L.）品种，由于盲目引进， 也带进了一些严重影响樱桃生长发育的病毒病。随着欧洲甜樱桃在我国的大面积推广栽培与无序的苗木繁殖， 加速了病毒在不同植株间的传播， 促进了病毒在植物体中的增殖和积累，严重影响了经济价值。美国、加拿大和英国的欧洲甜樱桃都曾因病毒病危害而减产30%以上，严重者全园崩溃。李属坏死环斑病毒侵染欧洲甜樱桃可使果园产量明显下降，减产25%～50%，有些株系减产在50%以上， 如果两种以上病毒复合侵染欧洲甜樱桃， 减产幅度更大。据国外报道，樱属病毒主要有68 种， 其中可以侵染欧洲甜樱桃的病毒约有34 种，比较常见的欧洲甜樱桃病毒主要有20 种。国内自开展樱桃病毒病的研究以来， 已经先后检测并报道了7 种病毒， 分别是李矮缩病毒（Prune dwarf virus，PDV）、李属坏死环斑病毒（Prunus necrotic ring spot virus,PNRSV）、樱桃小果病毒（Little cherry virus,LChV）、樱桃绿环斑驳病毒（Cherry green ring mottle virus, CGRMV）、樱桃病毒A（Cherry virus A,CVA）、樱桃坏死锈斑病毒（Cherry necrotic rusty mottle virus,CNRMV）、苹果褪绿叶斑病毒。

发明内容

本发明的目的在于提供一种不定根生长率高，生长速率快，质量好，得到的樱桃苗可完全脱毒的樱桃苗木的培育方法。

为实现上述目的，本发明采取的方案为：一种樱桃苗木的培育方法，包括外植体消毒、诱导丛生芽、继代增殖培养、生根壮苗培养和脱毒嫁接培养。其中，生根壮苗培养为：取苗高2cm以上的新梢转移到2~4mg/LIBA、0.1～0.3mg/LNAA、0.4～0.6g/L硝酸稀土液、0.5~0.9mg/L天冬氨酸二甲酯盐酸盐、1~3g/L果糖和5.0～6.0g/L琼脂粉的1/2MS培养基中，弱光处理4~6d后，转入光下诱导生根，然后将试管苗移栽于温室进行壮苗得到盆栽苗。天冬氨酸二甲酯盐酸盐的组成为70~75%L-天冬氨酸二甲酯盐酸盐和25~30%D-天冬氨酸二甲酯盐酸盐。1/2MS培养基中各成分有耦合作用，可有效提高多酚氧化酶（PPO）的活性，提高催化IAA与酚类物质的缩合反应速率，提高“IAA－酚酸复合物”的生成量，促进不定根形成，长出的根呈白色粗壮型，对水分和矿物质的吸收效率高。

外植体消毒为：从樱桃植株上切取刚萌动变绿尚未展叶的饱满芽，先用流水冲洗7~15min，再用2~8%洗衣粉浸泡3~6min，用60~75%酒精消毒3~8s，0.06~0.13%的次氯酸钠消毒10~20min，无菌水冲洗3~5次；在无菌环境下剥除芽外部叶原基，切取1.0mm以下茎尖分生组织，得到目标外植体。洗衣粉可降低植物材料表面张力，除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于酒精和次氯酸钠的直接接触消毒。