[发明专利]黄芪多糖在减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中的应用

说明书

本发明提供黄芪多糖在减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中的应用。本发明运用IL‑6、TNF‑α建立异常微环境诱导MSCs发生炎性损伤，观察黄芪多糖对MSCs发生炎性损伤的保护效应，得出IL‑6和TNF‑α的干预作用导致BMSCs出现炎性损伤，而黄芪多糖可减轻IL‑6和TNF‑α所致BMSCs的炎性损伤。

技术领域

本发明涉及黄芪多糖在减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中的应用。

背景技术

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是目前已开展临床应用细胞生物学治疗的理想干细胞之一，但其在异常干细胞微环境中的稳定性问题日渐受关注。目前已有不少研究证实MSCs在异常微环境中可发生生物学特性不稳定变化。本发明模拟建立诱发MSCs炎性损伤的培养体系；结合激光共聚焦技术、细胞形态观察以及蛋白印迹水平检测等分析黄芪多糖对炎性损伤的MSCs的保护作用。为黄芪多糖保护MSCs发生炎性损伤的作用提供理论与实验依据。

发明内容

本发明提供了黄芪多糖在减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中的应用。

本发明提供黄芪多糖在减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中的应用。

作为优选，所述人骨髓间充质干细胞炎性损伤是由IL-6和TNF-α所致。

作为优选，所述黄芪多糖的浓度为50μg/mL。

作为优选，所述黄芪多糖减弱IL-6和TNF-α所致的人骨髓间充质干细胞免疫表型变化和细胞形态变化。

作为优选，所述黄芪多糖降低人骨髓间充质干细胞中Ras、C-myc蛋白的表达，提高人骨髓间充质干细胞中P53、PTEN蛋白的表达。

作为优选，所述黄芪多糖恢复人骨髓间充质干细胞的细胞通讯功能。

本发明还提供黄芪多糖在制备减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤的药物中的应用。

将黄芪多糖按照现有技术中的方法制备成颗粒剂、胶囊剂等类型的药物，将其用于减轻人骨髓间充质干细胞炎性损伤中。

本发明运用IL-6、TNF-α建立异常微环境诱导MSCs发生炎性损伤，观察黄芪多糖对MSCs发生炎性损伤的保护效应。

具体方法为：以不同浓度的IL-6和TNF-α组合分别干预BMSCs。分为5组：BMSCs组(control组)、IL-6 50ng/mL+TNF-α50ng/mL干预组(A组)、IL-6 50ng/mL+TNF-α100ng/mL干预组(B组)、IL-6 100ng/mL+TNF-α100ng/mL干预组(C组)、IL-6 100ng/mL+TNF-α50ng/mL干预组(D组)。各组细胞分别连续培养7d，每72h更换培养液一次。每次换液之后补充IL-6、TNF-α，以维持其相应浓度。7d之后，细胞融合约达80～90％时将细胞进行传代培养。如此连续传6代细胞约42天后，收集细胞进行指标的检测。通过细胞形态学观察、细胞免疫表型检测、细胞通讯功能检测、肿瘤相关基因表达WB等检测IL-6、TNF-α建立异常微环境诱导MSCs发生的炎性损伤。运用黄芪多糖进行干预，观察其对MSCs发生炎性损伤发挥的保护效应。