[发明专利]一种近红外氧杂蒽类荧光染料在血吸虫成虫荧光标记中的应用

权利要求书

1.一种近红外氧杂蒽类荧光染料在血吸虫成虫荧光标记中的应用，所述近红外氧杂蒽类荧光染料具有式I所示结构：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将具有式I所示结构的近红外氧杂蒽类荧光染料、二甲基亚砜和磷酸缓冲液混合，得到荧光染料溶液；

(2)向所述步骤(1)中荧光染料溶液中加入血吸虫成虫，在15～35℃下孵育5min～6h，得到标记血吸虫成虫；

(3)在激发波长为635nm的条件下，将所述步骤(2)中标记血吸虫成虫的荧光标记情况进行检测，采集650～750nm的荧光信号进行荧光成像。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述磷酸缓冲液的pH值为7.0～7.4。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述荧光染料溶液的浓度为4～6μmol/L。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)具体为：

将具有式I所示结构的近红外氧杂蒽类荧光染料与二甲基亚砜混合，得到母液；

将所述母液与磷酸缓冲液混合，得到荧光染料溶液。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述母液的浓度为0.9～1.1mmol/L。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中血吸虫成虫的获取方法，包括以下步骤：

将感染血吸虫毛蚴的阳性钉螺放入清水中，在白炽灯下光照1.5～2.5h，逸出血吸虫尾蚴；

将六周龄雌性小鼠剪去腹部体毛，用水湿润所述小鼠的腹部皮肤，将含有45～55条所述血吸虫尾蚴的盖玻片贴于所述小鼠的腹部皮肤上，保持15～25min，使所述血吸虫尾蚴穿透所述小鼠的腹部皮肤进行感染，得到感染小鼠；

将所述感染小鼠饲养6～7周后，采取灌注法于所述感染小鼠的肝门-肠系膜静脉中收集血吸虫，将所述血吸虫在生理盐水中漂洗后在RPMI-1640细胞培养液中培养1.5～2.5h，得到血吸虫成虫。