[发明专利]一种来考诺肽的制备方法

说明书

本发明涉及一种来考诺肽的制备方法，解决了现有技术的副产物多、难纯化且产率低的技术问题。本发明提供一种来考诺肽的制备方法，以Fmoc‑氨基树脂为固相合成的载体，依次缩合27个保护氨基酸，得到来考诺肽的全保护前体线性肽树脂，然后分别进行固相和液相二硫键环化反应，形成3对二硫键的3组Cys的侧链保护基分别为Trt、Acm和Mob，再分别脱除Cys的侧链保护基，定向形成二硫键，提高二硫键连接的准确率，得到的粗肽经纯化、冻干，得到来考诺肽纯品多肽。本发明广泛应用于多肽药物制备技术领域。

技术领域

本发明属于多肽药物制备技术领域，特别涉及一种来考诺肽的制备方法。

背景技术

芋螺毒素是一类来源于芋螺毒液的生物活性多肽，能够特异性地作用于乙酰胆碱受体及其它神经递质的各种受体亚型，以及钙、钠、钾等多种离子通道。ω-芋螺毒素MVIIA和来考诺肽是N-型钙通道的强效、选择性阻滞剂，例如来自幻芋螺(Conos magus)的ω-芋螺毒素MVIIA，具有很好的镇痛效果，已被开发成治疗严重慢性疼痛的药物齐考诺肽(商品名为Prialt)，具有比阿片类镇痛药物更好的疗效。

来考诺肽，英文名称为Leconotide(代码名称CNSB004、AM336)，是一种从猫芋螺(C.catus)毒液中分离得到的ω-芋螺毒素多肽，又称为ω-芋螺毒素CVID，可用于治疗严重的慢性疼痛。与齐考诺肽需要鞘内注射相比，来考诺肽的毒性小，没有严重的心血管副作用，可经传统的静脉注射给药。

来考诺肽由27个氨基酸残基组成的多肽，C端羧基被酰胺化，分子含有三对二硫键，CAS号为247207-64-3，分子式为C107H179N35O36S7，分子量为2756.26g/mol，其结构如下：

专利CN104341496A公开了一种固相合成来考诺肽的方法，将得到的线性肽树脂在液相中通过一步氧化同时对三对二硫键进行环化。由于6个Cys的侧链保护基均采用Trt，会导致巯基配对错误，导致二硫键连接的准确率低，不能定向形成二硫键，易生成多种同分异构体产物，增加产物分离纯化难度，从而使产物收率低。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术的不足，依据来考诺肽的自身结构特点，提供一种可定向形成二硫键、无同分异构体产物生成、产物分离纯化简单、产物收率高的一种来考诺肽的制备方法。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：

一种来考诺肽的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：