[发明专利]一种制备埃博拉病毒核蛋白抗原的基因工程菌及应用在审
| 申请号： | 201810137429.3 | 申请日： | 2018-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN108342348A | 公开（公告）日： | 2018-07-31 |
| 发明（设计）人： | 黄弋;袁志明;朱友杰;杨梦诗 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02;G01N33/569;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 龚莹莹 |
| 地址： | 430071 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 埃博拉病毒 制备 核蛋白抗原 抗原 间接ELISA检测 基因工程菌 核蛋白 应用 基因工程菌株 超声破碎 抗原性质 抗原性 灵敏度 诱导 检测 | ||
【权利要求书】：
1.一种基因工程菌，所述的基因工程菌为：大肠杆菌 Escherichia coli Bl21(DE3)/pET-28a- ZEBOV-NP，保藏编号为：CCTCC NO：2014548。
2.权利要求1所述的基因工程菌在制备埃博拉病毒核蛋白抗原中的应用。
3.一种埃博拉病毒核蛋白抗原的制备方法，包括：向大肠杆菌 Escherichia coliBl21(DE3)/pET-28a- ZEBOV-NP 培养物中加入IPTG诱导蛋白表达，然后破碎细菌，离心，收集上清。
4.权利要求1所述的基因工程菌或权利要求3所述方法制备的抗原在制备埃博拉病毒ELISA检测试剂盒中的应用。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：大肠杆菌 Escherichia coli Bl21(DE3)/pET-28a-ZEBOV-NP过夜培养物按1：100加至新鲜LB，37 ℃培养3 h，测OD600=0.2~0.4；加入诱导剂IPTG诱导蛋白表达，诱导条件为：IPTG浓度0.4mM、诱导温度37℃、诱导时间3h；诱导完毕，8,000 rpm离心10 min，分离得到菌体；倒尽培养基残液，使用适量PBS重悬菌体（通常使用培养菌液的1/10体积），超声波破碎细胞至OD600<0.1，12,000 rpm离心10 min，收集上清。
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