[发明专利]抗病转基因大豆事件B5C9122-2外源插入片段侧翼序列及其应用

权利要求书

1.广谱抗花叶病毒转基因大豆事件B5C9122-2外源插入片段左边界和右边界侧翼序列，其特征在于，外源插入片段左边界侧翼序列如SEQ ID NO：2所示，外源插入片段右边界侧翼序列如SEQ ID NO：3所示，由来源于大豆基因组序列和来源于外源插入片段序列组成的DNA序列；其中：

外源插入片段左边界侧翼序列特征包括：

(1)SEQ ID NO：2第1-986位点序列来源于栽培大豆沈农9号基因组序列；

(2)SEQ ID NO：2的第987-1204位点序列来源于外源插入片段序列；

外源插入片段右边界侧翼序列特征包括：

(1)SEQ ID NO：3第1-326位点序列来源于外源插入片段序列；

(2)SEQ ID NO：3第327-1308位点序列来源于栽培大豆沈农9号基因组序列。

2.权利要求1所示侧翼序列在建立转基因大豆事件B5C9122-2特异性检测方法或制备检测试剂盒中的应用，其特征在于，依据权利要求1所示侧翼序列，制备特异性引物或探针。

3.权利要求1所述侧翼序列、权利要求2所述特异性检测方法或检测试剂盒在转基因大豆事件B5C9122-2检测中的应用，其中，检测对象包括亲本、衍生品系或品种，及其制品或产品。

4.权利要求2或权利要求3中所述特异性检测方法，其特征在于，其中一条引物为依据SEQ ID NO：2第1-986位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO：2第987-1204位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段左边界侧翼序列特异性检测引物。

5.权利要求2或权利要求3中所述检测试剂盒，其特征在于，其中一条引物为依据SEQID NO：2第1-986位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO：2第987-1204位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段左边界侧翼序列特异性检测引物。

6.根据权利要求4中所述外源插入片段左边界侧翼序列特异性检测引物，其特征在于：如SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示：

所述正向引物SEQ ID NO：4为：5’-ACTGGGACCTACCTAATCTGTGG-3’

所述反向引物SEQ ID NO：5为：5’-GCTGGCGTAATAGCGAAGAGG-3’。

7.权利要求2或权利要求3中所述特异性检测方法，其特征在于，其中一条引物为依据SEQ ID NO：3第1-326位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO：3第327-1308位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段右边界侧翼序列特异性检测引物。

8.权利要求2或权利要求3中所述检测试剂盒，其特征在于，其中一条引物为依据SEQID NO：3第1-326位点序列设计的正向引物，另一条引物为依据SEQ ID NO：3第327-1308位点序列设计的反向引物，即所述两条引物组合为权利要求1所述外源插入片段右边界侧翼序列特异性检测引物。

9.根据权利要求7中所述外源插入片段右边界侧翼序列特异性检测引物，其特征在于，如SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7所示：

所述正向引物SEQ ID NO：6为：5’-GTAAAGCCTGGGGTGCCTAATG-3’

所述反向引物SEQ ID NO：7为：5’-TTAAAGGCATATTATGTCATTTGCATAGCC-3’。