[发明专利]手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片、制备方法及应用有效
申请号: | 201810139762.8 | 申请日: | 2018-02-08 |
公开(公告)号: | CN108489939B | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
发明(设计)人: | 徐小艳;张燚;田兴国;徐振林;佘闯 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | G01N21/552 | 分类号: | G01N21/552;G01N21/41 |
代理公司: | 11321 北京市京大律师事务所 | 代理人: | 李洪群 |
地址: | 510000 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 色氨酸 芯片 分子印迹 手性识别 制备 实时动态监测 结合亲和力 特异性吸附 原位热聚合 功能单体 合成分子 聚多巴胺 绿色环保 模板分子 纳米材料 识别元件 芯片表面 芯片领域 芯片制备 多巴胺 功能化 交联剂 石墨烯 小分子 印迹膜 增敏 灵敏 应用 | ||
1.一种用于手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片的制备方法,其特征在于,所述SPR传感器芯片包括SPR芯片和分子印迹薄膜,所述方法包括如下步骤:
(1)修饰SPR芯片:在SPR芯片表面形成单分子自组装膜;
(2)将步骤(1) 经修饰的SPR 芯片浸入含有氧化石墨烯、L-色氨酸、多巴胺和过硫酸铵的预聚合液中,除氧后50~70℃条件下引发聚合,在SPR 芯片表面形成一层原位聚合的分子印迹薄膜,得到能够手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片。
2.根据权利要求1所述手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片的制备方法,其特征在于步骤(1) 所述SPR芯片为裸金芯片,修饰前需要清洗,清洗方法如下:
将裸金芯片放入Piranha洗液,待Piranha洗液降低到60℃以下放入裸金芯片浸泡5~10min;然后用去离子水和无水乙醇冲洗芯片,最后用氮气吹干,所述Piranha洗液是由浓H2SO4与浓度为30%的H2O2溶液混合配制而成,浓H2SO4与H2O2溶液体积比为7:(3~5)。
3.根据权利要求1所述手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片的制备方法,其特征在于步骤(1) 所述SPR芯片修饰的具体方法如下:将裸金芯片置于10~20mM的β-巯基乙胺-乙醇溶液中,浸泡20~30 h;取出芯片后,用去离子水和乙醇冲洗芯片表面,用氮气吹干。
4.根据权利要求1所述手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片的制备方法,其特征在于步骤(2)的具体方法如下:氧化石墨烯放入10~20 mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液中,冰水水浴超声30~40 min直至氧化石墨烯完全溶解,然后加入多巴胺和L-色氨酸、过硫酸铵,振荡并超声溶解5~10 min,通氮气除氧8~15 min,得到预聚合液;将经过修饰的SPR裸金芯片浸于预聚合液中,继续通氮5~10 min,密封反应容器,置于真空干燥箱50~70℃下聚合6~18 h,即可在芯片表面获得分子印迹薄膜;用甲醇-盐酸混合溶液洗脱3~4次,得到能够手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片。
5.根据权利要求4所述手性识别L-色氨酸的SPR传感器芯片的制备方法,其特征在于步骤(2)中氧化石墨烯与L-色氨酸的质量比为0.2~1.8,多巴胺与L-色氨酸的摩尔比为0.16~1.5,过硫酸铵与多巴胺的质量比为0.5~2.5。
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