[发明专利]一种检测血浆中替加环素浓度的方法

说明书

本发明属于体内药物检测技术领域，具体为一种检测血浆中替加环素浓度的方法。所述检测血浆中替加环素浓度的方法以雷尼替丁作为内标物质，用高效液相色谱仪在一定的色谱条件下，按内标法以峰面积计算血浆中替加环素的浓度。本发明采用高效液相色谱检测血浆中替加环素浓度，检测限可达0.028μg/mL；方法具有准确度和灵敏度高、简单快速等特点。

【技术领域】

本发明涉及体内药物检测技术领域，具体涉及一种检测血浆中替加环素浓度的方法。

【背景技术】

替加环素(TGC)为甘氨酞四环素类抗菌药物，其通过与细菌核糖体305亚基结合，阻断蛋白质的合成，从而发挥抗菌作用。TGC在临床上主要用于治疗革兰阳性菌和革兰阴性菌(铜绿假单胞菌除外)所致的多种严重感染，尤其是多药耐药菌和泛耐药菌所致的严重感染。TGC 进入人体后分布广泛，其剂量的59％通过胆汁排泄，33％通过肾脏排泄，肝功能不全的患者需调整剂量，而肾功能不全的患者则无需调整剂量。TGC在世界范围内的细菌耐药形势日益严峻门，目前己有对TGC耐药的菌株出现。此外，美国食品药品监督管理局(FDA)在TGC 药品说明书中添加了黑框警告，警示此药有增加总死亡率的风险。因此，对于肝功能不全的患者，在使用TGC时应进行血药浓度监测以保证用药的安全性和有效性。

目前国内已有高效液相色谱串联质谱法测定人血清中替加环素浓度的报道，但是多数市级医院不具备质谱检测器，这使得高效液相色谱串联质谱法的应用有一定局限性。

【发明内容】

本发明的发明目的在于：针对现有技术的不足，提供一种检测血浆中替加环素浓度的方法，所述方法采用高效液相色谱检测，检测限可达0.028μg/mL；方法具有准确度和灵敏度高、简单快速等特点。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种检测血浆中替加环素浓度的方法，所述方法以雷尼替丁作为内标物质，用高效液相色谱仪在一定的色谱条件下，按内标法以峰面积计算血浆中替加环素的浓度。

进一步地，所述方法包括以下步骤：

(1)液相色谱条件：

色谱柱：Diamonsil C18(5μm 250*4.6mm，Dikama Technologies)；

流动相：乙腈-0.1％甲酸，按表1中的规定进行梯度洗脱；

流速：1ml/min；

紫外检测波长：246nm；

内标：雷尼替丁；

柱温：40℃；

进样量：20μl；

表1流动相梯度洗脱表

(2)血浆样品的处理：

精密量取血浆样品400μl，加入6％高氯酸400μl，再加入4μl内标液，涡旋混匀，加入 20μl饱和醋酸铵溶液，涡旋混匀，离心，取上清液400μl转移至进样瓶，得到待检测样品待检测；

(3)标准曲线的制作