[发明专利]一种常温分离纯化外泌体的套管滤过装置在审
申请号: | 201810141987.7 | 申请日: | 2018-02-11 |
公开(公告)号: | CN108085245A | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
发明(设计)人: | 吴晓英 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | C12M1/24 | 分类号: | C12M1/24;C12M1/12 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人: | 颜勇 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 外管 分离纯化 滤过装置 套管 内管 微孔 塑料套管 选择性过滤 常温条件 平方毫米 容量刻度 生物活性 提取效率 仪器设备 圆形微孔 可清洗 螺旋盖 圆形尖 管壁 耗材 示踪 下端 消毒 悬挂 检测 节约 科研 环保 | ||
本发明公开了一种常温分离纯化外泌体的套管滤过装置。它包括一设有螺旋盖的塑料套管,塑料套管由外管和置于外管内的内管组成,外管为圆形尖底,表面有容量刻度,内管悬挂于外管内,底部为圆形平底,内管下端三分之一管壁及平面底部均匀开有圆形微孔,微孔直径≤1000nm,5000~8000个微孔/平方毫米。本发明可常温条件下温和、高效、纯化外泌体,大幅降低了提取外泌体的成本,提高了提取效率,解除了仪器设备的限制。由于方法温和,微孔直径的选择性过滤,分离纯化的外泌体生物活性更好,量更多,故更适用于科研及临床大规模外泌体的检测与示踪。另外,此套管滤过装置可清洗、消毒后重复使用,节约耗材,利于环保。
技术领域
本发明涉及一种外泌体的滤过装置,特别涉及一种常温分离纯化外泌体的套管滤过装置。
背景技术
外泌体是指一类直径30-1000nm,内含有蛋白质、脂质和核酸等多种成分的具有脂质双层结构的膜源性小囊泡。外泌体可以过细胞胞吐的形式释放到细胞外环境,存在于各种体液及培养细胞上清中。外泌体可将生物学活性物质选择性地递送至靶细胞,在不同细胞间进行信息传递,调节细胞间的信号传导,参与人体许多重要的生理或病理过程例如细胞生长、分化、增殖、血管形成、凋亡、肿瘤浸润及转移等,发挥多种重要的生物学功能。相较于组织活检,外泌体的“液体活检”有着创伤性小、操作简单、取样方便及样品源丰富等多个优势。外泌体的质量受到许多因素的影响。不同的提取方法影响外泌体以及其内容物的含量、活性。目前常用的是常温离心+超速离心+试剂盒的综合提取法,所提取的外泌体中杂质蛋白多且外泌体丢失严重,且超速离心成本高、受仪器及场地限制。
发明内容
为了解决现有外泌体提取存在的上述技术问题,本发明提供一种结构简单、使用方便的常温分离纯化外泌体的套管滤过装置。
本发明解决上述技术问题的技术方案是:一种常温分离纯化外泌体的套管滤过装置,包括一设有螺旋盖的塑料套管,塑料套管由外管和置于外管内的内管组成,外管为圆形尖底,表面有容量刻度,内管悬挂于外管端口内侧的凸起上,底部为圆形平底,内管下端三分之一管壁及平面底部均匀开有圆形微孔。
上述的分离纯化外泌体的套管滤过装置中,所述的微孔直径≤1000nm,5000~8000个微孔/平方毫米。
本发明的技术效果在于:本发明以物理学手段初步分离纯化了外泌体样品,可完全取代常温离心步骤,可根据样品检测级别酌情部分取代超速离心,为后续的实验如试剂盒提取等优化了样品,节省了提取成本,提高了外泌体的产量。由于方法温和,不受仪器及场地限制,且提取的外泌体生物活性更好、量更多,更适用于科研及临床大规模外泌体的检测与示踪。而且,本发明可清洗、消毒后重复使用,节约耗材,利于环保。
附图说明
图1为本发明的主视图。
图2为本发明的剖视图。
图3为本发明内管的结构图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
如图1、2、3所示,本发明包括一设有螺旋盖3的塑料套管,塑料套管由外管1和置于外管内的内管2组成,外管1为圆形尖底,表面有容量刻度,容量按需设置,通常为1.5ml,5ml,10ml,15ml,50ml,外管长度按需设置,通常为4cm-12cm,外管1上端口内侧设有凸起5,用于内管2的悬挂。内管2的长度必须短于外管1,为外管的3/1至2/1长,且其开口处固定在外管的开口处,内管2悬挂于外管1内凸起5上,底部为圆形平底,内管2下端三分之一管壁及平面底部均匀开有圆形微孔4,内管2和外管1共用同一螺旋盖3。微孔直径≤1000nm,微孔均匀分布,5000-8000个微孔/平方毫米,微孔壁四周打磨光滑
使用时,直接将目标液体收集装入内管2,常温静置自动通过内管过滤或放入常温普通离心机低速(≤2000g)离心加速过滤,待液体全部从内管滤过进入外管即可,收集外管内的液体,由于内管下端及底部有直径≤1000nm的微孔,经过内管的液体,去除了直径大于1000nm的杂质成份(蛋白质及细胞脆片等),而外泌体可以自由通过。
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