[发明专利]艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点G73C的引物及其应用在审
| 申请号： | 201810144208.9 | 申请日： | 2018-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN108411035A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 臧宁;余军;梁冰玉;蒋俊俊;陈荣风;杨全略;宁传艺;廖艳研;梁浩;叶力;黄颉刚 | 申请（专利权）人： | 广西医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530021 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 耐药突变位点 检测 核苷类逆转录酶抑制剂 艾滋病 碱基突变序列 艾滋病治疗 基因型检测 特异性扩增 基因类型 扩增曲线 实验周期 特异性强 特异序列 突变模板 下游序列 有效检测 病毒RNA 低丰度 可检测 灵敏度 试剂盒 氨基酸 丰度 碱基 位点 突变 应用 上游 | ||
1.艾滋病治疗药物NRTIs耐药突变位点G73C的引物，其特征在于为引物对一、引物对二、引物对三、引物对四或引物对五，每个引物对均由上游特异序列和下游序列组成；所述引物对一的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2的碱基序列；所述引物对二的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.3和SEQ.ID.NO.4的碱基序列；所述引物对三的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.5和SEQ.ID.NO.6的碱基序列；所述引物对四的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.7和SEQ.ID.NO.8的碱基序列；所述引物对五的上游特异序列和下游序列分别具有序列表SEQ.ID.NO.9和SEQ.ID.NO.10的碱基序列。
2.权利要求1所述引物在检测艾滋病治疗药物核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变位点G73C中的应用。
3.艾滋病治疗药物核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变位点G73C的ASPCR检测方法，其特征在于采用权利要求1所述引物，针对G73C位点突变以待检测样品的cDNA为模板进行PCR扩增。
4.根据权利要求3所述的ASPCR检测方法，其特征在于：所述PCR反应体系共25μL，其中2X SYBR Green PCR Master Mix 12.5μL，突变位点的上下游引物各1.0μL，待检样品cDNA模板2μL，ddH208.0μL，ROX 0.5μL；所述PCR反应程序为：①预变性95℃1min，②然后95℃10sec，退火60℃60min，延伸72℃1min，重复40个循环。
5.检测艾滋病治疗药物核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变位点G73C的试剂盒，其特征在于包括权利要求1所述引物。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于包括权利要求1所述引物、2X SYBR GreenPCR Master Mix、ddH20和ROX。
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