[发明专利]RIPK4作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中的应用

说明书

本发明的研究表明，BUC中RIPK4明显上调，RIPK4的表达诱导过度，而沉默RIPK4抑制体外和体内BUC的侵袭和转移。因此，RIPK4可作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中的应用。所述膀胱癌是指BUC。此外，我们证明RIPK4的上调会导致血管内皮生长因子A(VEGF‑A)水平增加。因此，RIPK4在制备靶向负性调控VEGF‑A表达制剂中可应用。同时，VEGF‑A也可作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中应用。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及RIPK4作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中的应用。

背景技术

膀胱尿路上皮癌(BUC)的发病率和死亡率在中国泌尿生殖系统肿瘤居首。BUC可分为非侵入性和侵入性亚型，后者具有更大的转移风险。转移性BUC仍然是一种致死性疾病，除一线治疗之外几乎没有治疗选择：转移性疾病患者的5年生存率仅为5％。

人膀胱肿瘤标本和小鼠模型研究BUC的进展和转移已经涉及多个信号通路。目前，对BUC中调节NF-κB通路的精确分子机制知之甚少。受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)是RIP激酶家族的成员，并且是丝氨酸/苏氨酸激酶。它最初被确定为角质形成细胞分化的重要调节因子，其编码基因在Bartsocas-Papas综合征中突变。最近，一些研究表明，RIPK4在某些类型的癌症如皮肤癌，卵巢癌，宫颈癌和结肠直肠癌中过表达，并且在异种移植肿瘤模型中，RIPK4表达增加促进卵巢癌。然而，RIPK4在BUC中的临床和生物学意义在很大程度上还不清楚。因此，需要广泛调查RIPK4在BUC中的功能。

发明内容

本发明旨在提供一种可以用于制备治疗膀胱癌药物的新靶点。

本发明通过评估RIPK4对NF-κB激活和BUC进展的影响。我们观察到，BUC中RIPK4明显上调，这种过度表达与BUC患者的生存期和临床病理特征显著相关。RIPK4的过度表达诱导，而沉默RIPK4抑制体外和体内BUC的侵袭和转移。此外，我们证明RIPK4可能通过K63连接，促进肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)，受体相互作用蛋白(RIP)和NF-κB的必需调节因子(NEMO)的多聚泛素化，从而在控制BUC的侵袭和转移中起重要作用。这促进NF-κB-p65的细胞质核转位，使NF-κB活性增加，最终导致血管内皮生长因子A(VEGF-A)水平增加。我们的研究结果表明，RIPK4是BUC在侵袭和转移中的关键参与者，并且RIPK4可成为BUC这种恶性肿瘤患者的新型预后生物标志物和治疗靶标。

本发明在25例冷冻保存的膀胱标本和112例BUC石蜡标本中检测RIPK4的表达。进行体内和体外测定来验证RIPK4对NF-κB通路介导的BUC进展的作用。

本发明在BUC组织中观察到RIPK4的高表达，并且是总体生存差的独立预测因子。上调或下调RIPK4的表达分别增强或抑制BUC细胞在体外和体内的迁移和侵袭。机制上，RIPK4促进由K63连接的，肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)，受体相互作用蛋白(RIP)和NF-κB必需调节因子(NEMO)的多聚泛素化。RIPK4还促进NF-κB-p65的核定位，并极大维持了NF-κB的活化，导致VEGF-A的上调，最终促进BUC细胞的侵袭性。

本发明的数据强调了RIPK4在BUC中的分子病因学和临床的重要性：RIPK4的上调促进NF-κB活化，并上调VEGF-A和促进BUC进展。靶向RIPK4可能是提高BUC患者生存率的一种新的治疗策略。

总之，本发明的研究表明，BUC中RIPK4明显上调，RIPK4的过度表达诱导，而沉默RIPK4抑制体外和体内BUC的侵袭和转移。因此，RIPK4可作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中的应用。所述膀胱癌是指BUC。此外，我们证明RIPK4的上调会导致血管内皮生长因子A(VEGF-A)水平增加。因此，RIPK4在制备靶向负性调控VEGF-A表达制剂中可应用。同时，VEGF-A也可作为靶位点在制备治疗膀胱癌药物中应用。

下面对本发明做进一步解释和说明：