[发明专利]一株产漆酶的二年残孔菌

说明书

本发明公开了一株产漆酶的二年残孔菌(Abortiporus biennis)LS‑4，属于生物技术领域。所述Abortiporus biennis LS‑4已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC M 2017822。该菌株所产漆酶催化性能高，对多种染料脱色能力显著，且粗酶液单位酶活催化效率高，有利于漆酶在印染废水处理等领域的应用。

技术领域

本发明涉及一株产漆酶的二年残孔菌(Abortiporus biennis)，属于生物技术领域。

背景技术

漆酶(laccase,EC 1.10.3.2)是一种含铜多酚氧化酶，最早是从漆树的分泌物中发现的。漆酶广泛存在于能有效降解木质素的白腐真菌中，它能通过单电子或多电子氧化催化许多底物，如多酚类、氨基酚类、芳香胺类与脂肪胺类等，基于漆酶的这一特性，它在造纸工业、废水处理、木材加工、生物修复、有机合成、生物传感等领域均具有广泛的应用前景。在工业废水中，往往有很大一部分是印染废水，对人类环境造成了极大的威胁。由于染料本身结构和组成的复杂性使得印染废水处理难度较大，通过漆酶高效环保的处理染料废水则成为一种有效手段。

漆酶主要存在于以担子菌和子囊菌为主的白腐真菌中，但这些真菌来源的漆酶在应用过程中还存在以下问题：(1)以真菌来生产天然漆酶时，存在生产效率低、催化条件受限、难以纯化等问题；(2)不同微生物来源的漆酶对不同结构类型染料的脱色作用具有特异性，即单种漆酶对不同类型染料的催化作用有强有弱，这为处理含有多种类型染料的废液也造成了一定困难；(3)目前分离得到的漆酶单位酶活对染料的脱色效率并不高，反应时间相对较长。因此，寻找催化效率高、作用范围广、成本低廉的优质酶源尤为重要。

二年残孔菌是隶属于残孔菌属的担子菌，国内外相关研究不多，但目前关于残孔菌发酵液中具体有效物质的研究如漆酶或其他木质素降解酶、利用残孔菌来进行染料高效脱色等研究均未得到展开。

发明内容

本发明的目的是提供一株产漆酶的二年残孔菌株。

本发明所述一株产漆酶的二年残孔菌株，其经分离筛选得到，为残孔菌属的一个新菌株，命名为Abortiporus biennis LS-4，已于2017年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2017822。

本发明所述Abortiporus biennis LS-4菌株，其菌丝体呈白色，气生菌丝旺盛，有明显的爬壁性，无色素分泌；生殖菌丝管状，透明，有明显的锁状联合。

本发明所述二年残孔菌株的分离筛选是通过对采集得到的样品进行消毒后，在有抗性的PDA培养基中进行反复纯化得到的。

本发明所述二年残孔菌株的鉴定是通过对其部分的18S rDNA序列进行BLAST比对和菌类分析，将该菌种鉴定为残孔菌属微生物，具体为一株二年残孔菌。

本发明中所述Abortiporus biennis LS-4的漆酶酶活测定是以ABTS为底物，在一定条件下与粗酶液反应，420nm下测定反应体系的吸光值，最终测得发酵第七天的漆酶酶活为28.8U/L，用考马斯亮蓝测蛋白的方法测得粗酶液蛋白含量为0.3mg/L。

在本发明的一种实施方式中，Abortiporus biennis LS-4的漆酶，粗酶液脱色实验结果显示酶液浓度仅为0.2U/mL即可对多类染料有良好的脱色效果，其中对靛蓝的脱色率在0.5h即达到98％，并逐渐稳定接近完全脱色。

本发明的优点：

本发明筛选得到一株具有高催化性能的残孔菌，其所产的漆酶脱色能力显著，粗酶液单位酶活催化效率高，具有良好的应用前景。本发明扩充了产漆酶的菌种库，也为寻找优质漆酶来源提供了更多的选择，有利于进一步提高漆酶的催化性能及其在印染废水等领域的深入应用。

生物材料保藏