[发明专利]一种在枯草芽孢杆菌中高效表达麦芽糖淀粉酶的方法有效
| 申请号： | 201810145993.X | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN108102996B | 公开（公告）日： | 2020-11-06 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;李雨桐 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/56;C12N15/75;C12N9/24;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 枯草 芽孢 杆菌 高效 表达 麦芽糖 淀粉酶 方法 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌重组菌，其特征在于，所述重组菌是以核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的序列为信号肽，异源表达了麦芽糖淀粉酶；所述麦芽糖淀粉酶的核苷酸序列如SEQID NO.4所示。
2.根据权利要求1所示的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以枯草芽孢杆菌CCTCCM2016536为宿主。
3.根据权利要求1所示的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以pHY300PLK作为表达载体。
4.构建权利要求1所述的枯草芽孢杆菌重组菌的方法，其特征在于，所述方法具体是：
以Bacillus subtilis 168基因组为模板PCR出核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的信号肽，将信号肽与麦芽糖淀粉酶基因与表达载体pHY300PLK进行重组构建，并转化至枯草芽孢杆菌CCTCC M2016536中得到重组菌。
5.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌重组菌发酵产麦芽糖淀粉酶的方法，其特征在于，所述方法具体为：将枯草芽孢杆菌重组菌接种于种子培养基中培养后转接至TB发酵培养基中培养。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述种子培养基为：蛋白胨8～12g/L，酵母粉4～6g/L，氯化钠8～12g/L；培养条件为35～38℃、180～220rpm下培养8-10h。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述TB发酵培养基为：酵母浸膏20～25g/L，大豆蛋白胨5～10g/L，甘油4～6g/L初始pH6～7。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述TB培养基中培养条件为：培养温度为40～41℃，180～220rpm培养45～50h。
9.权利要求1所述重组菌在淀粉糖化工业、食品烘焙、面粉工业中的应用。
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