[发明专利]一种基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法在审
| 申请号： | 201810146248.7 | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN108384801A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 陈景斌;袁星星;宋他·拔杰;崔晓艳;顾和平;林云;薛晨晨;陈新 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/02;A01H6/54 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳丽 |
| 地址： | 210014 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绿豆 目标序列 植株 连接序列 目标区域 基因 杂交种 反向互补序列 植物表达载体 花药 开花 细胞 表达水平 杂交制种 龙骨瓣 新种质 外露 引入 花粉 柱头 下调 传播 转化 | ||
1.一种基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法，其特征在于，包括对绿豆的cha基因进行RNA干扰，其中RNA干扰的目标区域为该基因的CDS序列。
2.根据权利要求1所述的基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法，其特征在于，RNA干扰的目标区域为cha基因的第三外显子。
3.根据权利要求1或2所述的基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法，其特征在于，通过向绿豆细胞内引入dsRNA对所述的目标区域进行干扰，其中dsRNA正义链具有SEQID NO.3所示的序列，反义链与正义链互补。
4.根据权利要求3所述的基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法，其特征在于，向绿豆细胞内引入dsRNA的方法包括：
(1)针对RNA干扰的目标区域设计DNA片段，所述的DNA片段为5’-目标序列-连接序列-目标序列的反向互补序列-3’，其中连接序列不与目标序列互补；
(2)将所述的干扰片段连入植物表达载体，获得RNAi载体；
(3)将所述的RNAi载体转化绿豆植株。
5.根据权利要求4所述的基于RNAi技术选育绿豆开花传粉植株的方法，其特征在于，所述的植物表达载体为pART27。
6.一种dsRNA，其特征在于，其中正义链具有SEQ ID NO.3所示的序列，反义链与正义链互补。
7.一种DNA片段，其特征在于，所述的DNA片段为5’-目标序列-连接序列-目标序列的反向互补序列-3’，其中连接序列不与目标序列互补，所述目标序列如SEQ ID NO.2所示。
8.含有权利要求7所述的DNA片段的重组载体、表达盒或宿主菌，其中重组载体为重组克隆载体或重组表达载体。
9.根据权利要求6所述的dsRNA、根据权利要求7所述的DNA片段、权利要求8所述的重组载体、表达盒或宿主菌在培育绿豆开花传粉植株中的应用。
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