[发明专利]一种用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：包括34个InDel位点和一个性别基因座的复合扩增引物，所述34个InDel位点和一个性别基因座为：rs1611001、rs2307959、rs16388、rs2307652、rs1610905、rs1305047、rs1610937、M117、rs2308292、rs28369942、rs16438、rs201771066、rs150042219、rs2308163、rs8190570、rs1305056、rs2307433、rs2308072、rs6481、rs1611048、Amelogenin(X/Y)、rs8178524、rs3081400、rs397832668、rs2307581、rs2307689、rs16363、rs2067235、rs17878444、rs146044344、rs2307924、rs17238892、rs17879936、rs1610963、rs140847；

所述34个InDel位点和一个性别基因座的复合扩增引物的序列如下表中SEQ ID NO.01～SEQ ID NO.70所示：

2.根据权利要求1所述的用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：复合扩增引物分为下列四组：

第一组：SEQ ID NO.01～02、SEQ ID NO.03～04、SEQ ID NO.05～06、SEQ ID NO.07～08、SEQ ID NO.09～10、SEQ ID NO.11～12、SEQ ID NO.13～14、SEQ ID NO.15～16、SEQ IDNO.17～18；

第二组：SEQ ID NO.19～20、SEQ ID NO.21～22、SEQ ID NO.23～24、SEQ ID NO.25～26、SEQ ID NO.27～28、SEQ ID NO.29～30、SEQ ID NO.31～32、SEQ ID NO.33～34、SEQ IDNO.35～36、SEQ ID NO.37～38；

第三组：SEQ ID NO.39～40、SEQ ID NO.41～42、SEQ ID NO.43～44、SEQ ID NO.45～46、SEQ ID NO.47～48、SEQ ID NO.49～50、SEQ ID NO.51～52、SEQ ID NO.53～54；

第四组：SEQ ID NO.55～56、SEQ ID NO.57～58、SEQ ID NO.59～60、SEQ ID NO.61～62、SEQ ID NO.63～64、SEQ ID NO.65～66、SEQ ID NO.67～68、SEQ ID NO.69～70。

3.根据权利要求2所述的用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：四组引物是用不同的荧光染料进行标记的，第一组到第四组分别用FAM色、HEX色、TAMRA色和ROX色荧光染料进行标记。

4.根据权利要求1所述的用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：试剂盒内还包括反应缓冲液和热启动Taq酶。

5.权利要求1～4任一项所述的一种用于插入缺失多态性检测的荧光标记复合扩增试剂盒的应用，其特征在于：用于亲缘关系鉴定、同胞鉴定、个体识别。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：包括如下步骤：

(1)从生物检材提取基因组DNA，作为DNA模板；或直接以血滤纸或唾液卡为模板，无需提取；

(2)配制PCR反应液：将反应缓冲液、热启动Taq DNA聚合酶、复合引物、sdH₂O和DNA模板混合，采用三步扩增法，对待检测的多态性位点进行PCR扩增；

(3)对扩增产物进行荧光凝胶电泳分析和基因分型。