[发明专利]一种全酶法制备交替糖寡糖的方法

权利要求书

1.一种制备交替糖寡糖的方法，其特征在于，以马铃薯淀粉和蔗糖为原料，分步骤添加高温酸性α-淀粉酶、β-淀粉酶、普鲁兰酶、麦芽糖淀粉酶和交替糖蔗糖酶，经过预处理、糊化、液化、糖化和生成交替糖寡糖的步骤，制备交替糖寡糖，步骤如下：

预处理、糊化：将10％(m/v)马铃薯淀粉悬浮于50mM、pH 4.5磷酸缓冲液，在沸水浴中连续搅拌1.5min使淀粉糊化；

液化：加入10U/g高温酸性α-淀粉酶，在沸水浴中连续搅拌4min后，加入1M盐酸将pH调节至4.0以下，以终止液化；

一次糖化：将淀粉液化液冷却至室温，调节pH至5.2，加入15U/gβ-淀粉酶和1U/g普鲁兰酶，在60℃下反应24h；

二次糖化：将反应液pH调节至5.5，加入9.3U/g麦芽糖淀粉酶，在60℃下反应10h；

生成交替糖寡糖：经过二次糖化后，灭酶，依次加入20％(m/v)蔗糖和5U/g交替糖蔗糖酶，在40℃下反应34h。

2.根据权利要求1所述的一种制备交替糖寡糖的方法，其特征在于，所述麦芽糖淀粉酶是Bacillus stearothermophilus、Bacillus licheniformis、Thermus vulgaris、Bacillus cereus或Bacillus subtilis来源的。

3.根据权利要求1或2所述的一种制备交替糖寡糖的方法，其特征在于，所述交替糖蔗糖酶是Leuconostoc citreum、Leuconostoc mesenteroides、Leuconostoc fallax、Leuconostoc gelidum或Oenococcus oeni来源的。

4.根据权利要求1～3任一所述方法制备得到的交替糖寡糖。

5.权利要求4所述交替糖寡糖在制备低升糖糖浆剂、制药或者制备益生元中的应用。