[发明专利]一种改良赖氨酸脱羧酶、生产方法及其应用有效
| 申请号： | 201810150350.4 | 申请日： | 2018-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN110157750B | 公开（公告）日： | 2023-09-22 |
| 发明（设计）人： | 陈玲;刘修才 | 申请（专利权）人： | 上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N9/88;C12N15/60;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京律智知识产权代理有限公司 11438 | 代理人： | 于宝庆;崔香丹 |
| 地址： | 201203 上海市自*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改良 赖氨酸 脱羧酶 生产 方法 及其 应用 | ||
1.一种利用表达改良型赖氨酸脱羧酶的宿主细胞对赖氨酸进行脱羧的方法，所述改良型赖氨酸脱羧酶由SEQ ID NO：8所示的序列组成，或者由SEQ ID NO：7所示的序列编码，其中所述宿主细胞中cadA基因起始密码子上游序列SEQ ID NO:17被替换为SEQ ID NO:18，所述方法包括使所表达的改良型赖氨酸脱羧酶与赖氨酸接触的步骤。
2.一种赖氨酸脱羧酶的生产方法，所述方法包括培养含有核苷酸序列SEQ ID NO：7所示的序列的宿主细胞。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述宿主细胞在30℃至42℃温度下培养。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述宿主细胞在30℃或42℃的温度下培养。
5.如权利要求1或2所述的方法，其中所述宿主细胞选自大肠杆菌(E.coli)，枯草芽孢杆菌(B.subtilis)，天蓝色链霉菌(S.coelicolor)，蜂房哈夫尼菌(H.alvei)和谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)。
6.如权利要求5所述的方法，其中所述宿主细胞是蜂房哈夫尼菌(H.alvei)。
7.如权利要求5所述的方法，其中所述宿主细胞是不含有内源性质粒的蜂房哈夫尼菌。
8.如权利要求5所述的方法，其中宿主细胞中转化有包含SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.18所示序列的质粒。
9.如权利要求5所述的方法，其中赖氨酸脱羧反应在6.0至8.0的pH下进行。
10.如权利要求9所述的方法，其中赖氨酸脱羧反应在6.0或8.0的pH下进行。
11.一种多核苷酸，其序列为SEQ ID NO：7。
12.一种赖氨酸脱羧酶，其由SEQ ID NO：8所示的序列组成。
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