[发明专利]一种皮米级细胞提取物的制备方法在审
申请号: | 201810150469.1 | 申请日: | 2018-02-13 |
公开(公告)号: | CN108542877A | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 马颖;杨阳;阮雯莉 | 申请(专利权)人: | 广州资生生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K8/99 | 分类号: | A61K8/99;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08;A61Q17/04;A61K35/30;A61P17/02;A61P17/18;A61P17/00;A61P17/16;A61P39/06 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张春水;唐京桥 |
地址: | 510000 广东省广州市天河区珠*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞提取物 制备 细胞悬液 种皮 皮肤损伤修复 干细胞技术 间歇式超声 上清液过滤 动物组织 皮肤损伤 人体皮肤 抗衰老 上清液 水混合 振荡 切片 冷冻 细胞 修复 申请 吸收 应用 | ||
1.一种皮米级细胞提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)将动物组织冷冻固定,切成厚度为2~100μm的薄片;
b)将所述薄片和水混合,振荡,得到细胞悬液;
c)将所述细胞悬液在4℃~10℃的温度下进行间歇式超声10~15min,离心,得到上清液;
d)将所述上清液过滤,收集滤液,得到所述皮米级细胞提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述皮米级细胞提取物的分子量在100K以下。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤b)和步骤c)之间还包括:将所述细胞悬液在4℃下冷藏1h,使得所述间歇超声的温度维持在4℃~10℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述间歇式超声的超声波频率为15~25kHz,超声时间为10~15min。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述间歇式超声为:首先超声30~50s,然后停止超声50s,接着继续超声,如此重复10个循环。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤b)所述振荡的温度为3~5℃,时间为1~2h。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述间歇式超声在超声波细胞粉碎仪中进行;
所述超声波细胞粉碎仪的超声波振动棒浸入所述组织悬液中,其底部与所述组织悬液的底部存在预置距离;
所述预置距离为3~4cm。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤c)所述离心为:在5500~6500rpm下离心30~40min。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述动物组织为来源于大脑、心脏、肝脏、肺、胃粘膜、肠粘膜、卵巢、肌肉或骨骼的新鲜组织。
10.如权利要求1至9任意一项所述制备方法或由所述制备方法得到的皮米级细胞提取物在制备促进皮肤修复和/或抗衰老制剂中的应用。
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