[发明专利]阻断型PD-L1驼源单域抗体及其用途

权利要求书

1.一种抗PD-L1单域抗体VHH链的互补决定区CDR，其特征在于，所述VHH链的互补决定区CDR包含：

SEQ ID NO:5所示的CDR1、SEQ ID NO:6所示的CDR2，SEQ ID NO:7所示的CDR3。

2.一种抗PD-L1单域抗体的VHH链，其特征在于，所述VHH链包括框架区FR和权利要求1所述的互补决定区CDR。

3.如权利要求2所述的VHH链，其特征在于，所述的框架区FR选自下组的一种：

(a)SEQ ID NO:1所示的FR1，SEQ ID NO:2所示的FR2，SEQ ID NO:3所示的FR3，SEQ ID NO:4所示的FR4组成；

(b)SEQ ID NO:10所示的FR1，SEQ ID NO:11所示的FR2，SEQ ID NO:12所示的FR3，SEQ ID NO:13所示的FR4组成。

4.一种抗PD-L1单域抗体，其特征在于，它是针对PD-L1表位的单域抗体，并且具有权利要求2所述的VHH链。

5.如权利要求4所述的单域抗体，其特征在于，所述单域抗体包括单体或二聚体。

6.如权利要求4所述的单域抗体，其特征在于，所述单域抗体如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:14所示。

7.一种PD-L1单域抗体-Fc融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白从N’-C’端具有如下元件：

A-Fc；

其中，A元件为SEQ ID NO:14所示的序列；

“-”代表肽键。

8.如权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。

9.一种抗PD-L1单域抗体四价体，其特征在于，所述四价体具有如下结构

A-L-P~P-L-A；其中，

P元件为权利要求7所述的融合蛋白，

A元件为SEQ ID NO:14所示的序列；

L代表连接子；

“-”代表肽键；

“~”代表二硫键。

10.如权利要求9所述的抗PD-L1单域抗体四价体，其特征在于，所述连接子选自以下序列：GGGGSGGGS、GS、(GGGGS)n，其中n=1或2或3或4。

11.如权利要求9所述的抗PD-L1单域抗体四价体，其特征在于，所述PD-L1单域抗体四价体的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示。

12.一种多核苷酸或其组合，其特征在于，所述多核苷酸编码选自一种或多种蛋白质：如权利要求1所述的抗PD-L1单域抗体VHH链的CDR区、如权利要求2所述的抗PD-L1单域抗体的VHH链、如权利要求4所述的抗PD-L1单域抗体、或如权利要求9所述的四价体。

13.如权利要求12所述的多核苷酸或其组合，其特征在于，所述多核苷酸选自下组的一种或多种：SEQ ID NO:9、15、18所示的核苷酸序列。

14.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有如权利要求12所述的多核苷酸或其组合。

15.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求14所述的表达载体，或其基因组中整合有如权利要求12所述的多核苷酸或其组合。

16.如权利要求15所述的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞选自下组：哺乳动物细胞、大肠杆菌、酵母细胞、噬菌体。