[发明专利]一种黄精多糖的制备方法及应用

说明书

本发明涉及中药有效成分的制备方法及其应用领域，具体涉及一种黄精多糖的制备方法及其在制备免疫增强药物中的应用。将黄精生药材经过炮制、提取分离后得到黄精多糖，采用本发明的提取方法，黄精多糖提取率高，且总多糖含量高，黄精多糖对正常小鼠脾细胞增殖活力有所提高，也可提高由环磷酰胺诱导免疫低下的小鼠的脾脏与胸腺指数，增强刀豆蛋白A刺激下脾脏与胸腺细胞体外增殖能力，增强免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能和分泌IL‑6和TNF‑α的能力，在免疫缺陷病和肿瘤等疾病的治疗方面，具有实际应用价值。

技术领域

本发明涉及中药有效成分的制备方法及其应用领域，具体涉及一种黄精多糖的制备方法及其在制备免疫增强药物中的应用。

背景技术

黄精为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red.或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。性味甘平，归脾、肺、肾经，具有补气健脾之功效。黄精具有可食用、药用、观赏、美容等作用，常用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴。

黄精多糖是黄精的主要有效成分之一，具有抗肿瘤、抗衰老、抗动脉粥样硬化等功能。

黄精中的多糖含量普遍在10％以上，目前用于提取黄精多糖的提取分离方法包括热水提取、醇析分离、微波辅助提取、超声波提取等，但是提取的多糖纯度不高(<80％)。结合现代化学与药理研究成果，对黄精多糖类成分加以开发利用，发掘新药，将对传统中药黄精的开发与应用有现实意义。

环磷酰胺作为临床上常用的抗肿瘤药物，可杀伤肿瘤细胞，同时具有明显的免疫抑制作用。大量的药理学研究表明，一些多糖类的化合物能够调节免疫，激活机体的免疫细胞，提高机体的免疫功能。本发明旨在探究黄精多糖对环磷酰胺诱导小鼠免疫低下的影响，为黄精多糖作为环磷酰胺的免疫佐剂提供合理的依据。

发明内容

本发明的第一个目的是提供了一种黄精多糖的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种黄精多糖的制备方法，包括如下步骤：

(1)将黄精生药材洗净，加水浸泡(10-20分钟)后堆积在干净的台面上4-10h，用湿布遮盖，期间喷洒清水，润至药材内无干心，然后蒸至黄黑色、柔软为度，关火继续焖至外表棕黑色、有光泽，出锅，晾至外干内润，切成(3～5)mm厚片，烘干；

(2)取步骤(1)的切片，研成粉末，用80～95％(v/v)的乙醇水溶液回流提取2-3次，过滤，所得药渣烘干；

(3)向步骤(2)的烘干后的药渣中加入蒸馏水于80℃回流提取2-4次，过滤，滤液浓缩至浸膏状态后，加入乙醇，至乙醇含量为70％-90％(v/v)，搅拌均匀，然后于4℃下放置(8-12)h，过滤，沉淀烘干，即得粗多糖；

(4)将步骤(3)所得粗多糖用Sevage法除去蛋白；

(5)将步骤(4)除去蛋白后的多糖用水溶解后，于流水中透析48h；取透析液真空冷冻干燥，得到黄精多糖。

进一步的，所述步骤(1)中加水浸泡后在蒸笼中蒸4～8h，关火继续焖4～8h，出锅；优选为在蒸笼中蒸6h，关火继续焖6h，出锅。

进一步的，步骤(1)中所述烘干为置于恒温烘干箱70℃烘干。

进一步的，步骤(2)中所述烘干温度低于50℃。

进一步的，步骤(2)中所述用80～95％(v/v)的乙醇水溶液回流提取的过程为：用95％(v/v)乙醇于60℃回流3h，过滤；然后向所得固体中加入80％(v/v)乙醇于60℃回流2h，过滤，药渣烘干；