[发明专利]一种非衍生化法检测试剂盒

说明书

本发明涉及一种非衍生化法检测试剂盒。具体地，本发明提供一种非衍生化法检测试剂盒，所述试剂盒包括内标品、萃取剂、流动相。本发明所述的试剂盒与高效液相‑质谱联用能够准确、快速、高效和高灵敏的检测出生物样品中氨基酸和酰基肉碱的含量，从而对疾病进行筛查和预防治疗，且操作简洁快速，准确率和灵敏度高。

技术领域

本发明涉及化学分析检测技术领域，具体地，本发明涉及一种非衍生化法检测试剂盒。

背景技术

遗传性代谢病又称先天性代谢缺陷(inborn error of metabolism，IEM)，常常是由基因突变导致遗传性生化代谢功能缺陷所造成的一类遗传病，涉及氨基酸、胆碱、有机酸、脂肪酸、碳水化合物、溶酶体、类固醇等多种物质代谢的异常。其单一病种患病率较低，但由于种类繁多，总体发病率较高。该类疾病发病后常呈进行性加重，如未能早期识别诊断、干预、治疗，常导致早期夭折或终身残疾，且以神经、智力残疾为最多，会严重影响人口素质，造成家庭和社会的沉重负担。因此开展IEM的早期筛查，实现早期诊断，成为IEM防治的关键，对避免和减少残疾儿童的发生，提高人口素质，推动国民经济发展有着重要的意义。目前，IEM的诊断方法主要有枯草杆菌抑制试验、酶活性测定、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)、单基因分析等。这些诊断方法用于IEM筛查具有局限性：(1)普遍通量低，一般一次只能检测一种至几十种，不能满足IEM可检出病种的逐年增多，并且需要对遗传性代谢病有准确的预判；(2)不同IEM的检测方法各异，且样本多样，如一些疾病检测蛋白水平、而另一些疾病则检测基因水平，有些疾病需要尿液样本、而另一些则需要血液样本。因此不太适合开展大规模的遗传性代谢病的筛查，亟需要一种能高通量检测IEM多种疾病的技术。

综上，本领域亟需开发一种快速、高效、操作简洁、准确率和灵敏度高的检测方法，用来检测代谢物质，从而能够早期识别、诊断、干预、治疗遗传性代谢病。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速、高效、操作简洁、准确率和灵敏度高的非衍生化法检测试剂盒，用来检测代谢物质，从而能够早期识别、诊断、干预、治疗遗传性代谢病。

本发明的第一方面，提供了一种非衍生化法检测试剂盒，所述试剂盒包括内标品、萃取剂、流动相；

其中，所述的内标品包括：同位素标记氨基酸内标品、同位素标记肉碱内标品、同位素标记酰基肉碱内标品，或其组合；

所述的流动相包含甲醇、水、羧酸，其中甲醇含量为50％-100％(v/v)，羧酸浓度为0.05-1mol/L，溶剂为水。

在另一优选例中，所述的萃取剂包括甲醇、水、羧酸混合液，其中甲醇含量为65％-95％(v/v)，优选70％-90％(v/v)，羧酸浓度为0.1-0.5mol/L，溶剂为水。

在另一优选例中，所述同位素标记的氨基酸包括同位素标记的丙氨酸、同位素标记的脯氨酸、同位素标记的亮氨酸、同位素标记的鸟氨酸、同位素标记的甲硫氨酸、同位素标记的苯丙氨酸、同位素标记的精氨酸、同位素标记的瓜氨酸、同位素标记的酪氨酸、同位素标记的甘氨酸、同位素标记的缬氨酸中的一种或多种。