[发明专利]一类广泛活性环七肽Reniochalistatin A-D的合成方法

权利要求书

1.一类广泛活性环七肽Reniochalistatin A-D的合成方法，其特征在于主要包括以下步骤：

（1）向2-氯树脂中加入二氯甲烷溶胀30min，然后抽干滤液并加入芴甲氧羰酰基脯氨酸、二异丙基乙胺和溶剂二氯甲烷，搅拌反应4h，得带Fmoc保护基的氨基酸-树脂复合物；

（2）向步骤（1）中得到的带Fmoc保护基的氨基酸-树脂复合物中加入二异丙基乙胺的甲醇溶液，搅拌反应30min，使带Fmoc保护基的氨基酸-树脂复合物的树脂上残余的反应位点封闭；

（3）将步骤（2）中得到的反应位点封闭的产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-2发生缩合反应，得到带Fmoc保护基的二肽-树脂复合物；

（4）将步骤（3）得到的带Fmoc保护基的二肽-树脂复合物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在的条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-3发生缩合反应，得到三肽-树脂复合物；

（5）将步骤（4）所得产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在的条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-4发生缩合反应，得到四肽-树脂复合物；

（6）将步骤（5）所得产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在的条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-5发生缩合反应，得到五肽-树脂复合物；

（7）将步骤（6）所得产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在的条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-6发生缩合反应，得到六肽-树脂复合物；

（8）将步骤（7）所得产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物在缩合试剂和溶剂N,N-二甲基甲酰胺存在的条件下与带Fmoc保护基的氨基酸-6发生缩合反应，得到七肽-树脂复合物；

（9）将步骤（8）所得产物用体积分数为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脱除芴甲氧羰酰基保护，脱保护后的产物与体积分数为2%的TFA/DCM溶液反应以切断树脂，反应结束后将所得反应液纯化即得获得线性七肽;

（10）将步骤（9）所得的产物线性七肽溶于DCM中，然后加入环合试剂PyBOP，并用DIEA调节pH=8，发生环合反应，将环合反应后的反应液纯化即得目标产物环七肽；

当带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7中有至少一个氨基酸带有别的非Fmoc的保护基团时，则在步骤（10）后还包括以下的步骤（11）：

（11）向步骤（10）的产物中加入体积分数为95%的TFA/H₂O溶液，搅拌反应脱除非Fmoc的保护基团，反应结束后将所得反应液纯化即得目标产物；

当合成产物为Reniochalistatin A时，带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7依次对应为Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asn（Trt）-OH；

当合成产物为Reniochalistatin B时，带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7依次对应为Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ile-OH；

当合成产物为Reniochalistatin C时，带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7依次对应为Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ile-OH；

当合成产物为Reniochalistatin D时，带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7依次对应为Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH；

当带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7中的任意一种带Fmoc氨基保护基的氨基酸为芳香族氨基酸或脯氨酸时，其所对应的缩合试剂为Oxyma /DIC；

当所述的带Fmoc氨基保护基的氨基酸-2、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-3、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-4、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-5、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-6、带Fmoc氨基保护基的氨基酸-7中的任意一种带Fmoc氨基保护基的氨基酸为非脯氨酸的脂肪族氨基酸时，所对应的缩合试剂为DEPBT/ DIEA;

步骤（1）中所述的2-氯树脂指2-氯三苯基甲基氯树脂。