[发明专利]一种抗菌活性环六肽Thermoactinoamide A的合成方法

说明书

本发明属于具有广泛抗菌活性化合物合成领域，公开了一种抗菌活性环六肽Thermoactinoamide A的合成方法。该方法采用多肽固相合成法，合成工艺简单，原料成本低，反应条件温和，其中芳香族氨基酸和缬氨酸使用Oxyma/DIC体系作为缩合剂，而脂肪族氨基酸特别是亮氨酸和异亮氨酸使用DEPBT/DIEA体系作为缩合剂，八步反应得到的线性环六肽的收率为87.11％，纯度为95％以上，环化反应后所得环六肽的产率为85.23％，纯度99％以上，总产率74.24％，所得产品纯度高、产率高，易于实现产业化，具有很高的医学价值和广阔的市场前景。

技术领域

本发明属于具有广泛抗菌活性化合物合成领域，特别涉及一种抗菌活性环六肽Thermoactinoamide A的合成方法。

背景技术

环肽类化合物作为一种海洋药物越来越受到科学家们的关注，是因为环肽可以利用不同氨基酸的连接形成新的独特结构并具有优良的生物活性，为新型药物的开发与研究提供重要的指导作用(Y.Lee et al.Peptides 95(2017)94–105；Tapeinou A etal.Biopolymers,2015,104(5):453-461)。虽然在自然界中分离得到的环肽结构很多，但其产量远远不能满足实际应用，所以人工合成环肽是现在最热的课题之一。

Thermoactinoamide A是从冰岛西部的斯奈山半岛(Snaefellsness peninsula)采集的细菌菌株(ISCAR 2354)中分离得到的一种新型环六肽，它对特定菌株表现出非常好的抗性，如金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538(MIC₅₀＝0.11μM),粪肠球菌E.faecalis(MIC₅₀＝4.59μM),克雷白氏肺炎杆菌K.pneumoniae(MIC₅₀＝3.17μM)。(ValeriaCostantino，Alfonso Mangoni，J.Nat.Prod.2017,80,2530-2535)正因为其对葡萄球菌的高效抗性，该化合物可能成为新型的海洋药物。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种抗菌活性环六肽Thermoactinoamide A的合成方法。

Thermoactinoamide A是一个环六肽(D-异亮氨酰-亮氨酰-D-亮氨酰-亮氨酰-缬氨酰-D-酪氨酰)【英文缩写表达cyclo-(D-allo-Ile-Leu-D-Leu-Leu-Val–D-Tyr)】，分子式为C₃₈H₆₃N₆O₇，白色固体，结构式参见下式：

本发明的目的通过下述方案实现：

一种抗菌活性环六肽Thermoactinoamide A的合成方法，采用多肽固相合成法，主要包括以下步骤：

以2-氯树脂为载体，将带Fmoc氨基保护基的芴甲氧羰酰基D-异亮氨酸(Fmoc-D-allo-Ile-OH)的羧基一端与2-氯树脂连接得以固定，然后将树脂上的残余的反应位点封闭，用20％(体积分数)哌啶的DMF溶液脱去氨基上Fmoc的保护，与下一个带Fmoc氨基保护基的氨基酸在缩合试剂存在条件下发生缩合反应，从而获得二肽-树脂复合物，重复脱去氨基上Fmoc的保护、与氨基酸发生缩合反应等操作，直至得到六肽-树脂复合物；然后用体积分数为2％的TFA的DCM溶液切断树脂，获得线性六肽，线性六肽经环合试剂环合得最终产物环六肽即Thermoactinoamide A。