[发明专利]一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法

说明书

本发明属于生物医药和功能性食品领域，特别涉及一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法。本发明公开了一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法，步骤如下：1)亚麻籽壳仁分离；2)亚麻籽多糖的提取；3)脱蛋白和醇沉；4)柱层析纯化。本发明所述亚麻籽多糖FHP‑2制备方法简单、高效、快速，可作为制备亚麻籽多糖的一般工艺进行推广，所述新型亚麻籽多糖FHP‑2具有抗乙肝病毒和免疫调节活性，有潜力开发为新型药物和功能食品添加剂。

技术领域

本发明属于生物医药和功能性食品领域，特别涉及一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法。

背景技术

亚麻(Linumustitatissimum L.)，又称胡麻、鸦麻，属亚麻科亚麻属一年生草本植物，广泛分布于世界50多个国家，主要产地有加拿大、中国、印度、美国、埃塞俄比亚等国家，世界范围内种植面积在260万公顷。亚麻籽是亚麻的种子，常作为一种重要的油料种籽，世界范围内年产量在230万吨左右。亚麻籽中富含脂肪、蛋白质、膳食纤维素、维生素、矿物质等营养成分以及ω-3/6不饱和脂肪酸、木酚素、植物多糖、环肽等功能因子，具有多种营养功能和保健功效。其中亚麻籽多糖是从亚麻籽中提取出来的天然高分子聚糖体，作为一种可溶性的膳食纤维，亚麻籽多糖有降低血胆固醇水平、减少冠状动脉硬化、降低糖尿病、预防结肠癌等作用，此外，亚麻籽多糖还具有良好的持水性、胶凝性、乳化性，常以亚麻籽胶的形式用做食品添加剂。研究表明亚麻籽多糖由酸性多糖和中性多糖组成，酸性多糖主要由鼠李糖、岩藻糖、半乳糖醛酸组成；中性多糖主要由阿拉伯糖、木糖、半乳糖组成。

多糖为来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞壁中的天然高分子化合物，是构成生命的四大基本物质之一。近年来，由于其重要的生理功能而引起了人们越来越大的兴趣，对植物多糖的研究己成为药物研究的热点之一。大量实验研究表明，多糖类成分是人体内重要的信息物质，参与人体的许多生理和病理过程。植物多糖来源广泛，目前已有百余种植物的多糖被分离提取出来，其最大的优点是没有细胞毒性，作为药物毒副作用小，因此，国内外有大量聚焦于植物多糖及其结构、活性的研究。但是，目前关于亚麻籽多糖的研究报道还较为少见，目前公开的与亚麻籽多糖的提取或制备相关的专利有：中国专利申请公布号CN1221771、CN1242952、CN1263139，这些专利涉及的内容都是关于传统的热水浸提亚麻籽胶工艺的改进，并未涉及到亚麻籽多糖的结构及生物活性。专利申请号CN201510391862.6研究了一种新型亚麻籽多糖FHP-1的制备及其免疫调节、抗病毒活性，但是工艺过程十分复杂，制备效率低，产品得率不高，快速、高效制备具有抗病毒和免疫调节活性的高纯度亚麻籽多糖的研究尚未见报道。

发明内容

针对传统方法制备亚麻籽多糖的效率低下问题，本发明的首要目的是在于提供一种新型亚麻籽多糖FHP-2的简单、快速制备工艺，本发明的另一个目的是采用这种快速制备方法得到新型亚麻籽多糖FHP-2。

本发明目的通过以下技术方案实现：

一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法，包括以下步骤：

1)亚麻籽壳仁分离：采用乙醇湿法过滤技术实现亚麻籽壳仁分离。亚麻籽经充分破碎后，采用乙醇洗涤脱脂，然后混合料液过筛，筛截留部分为脱脂亚麻籽壳，干燥后得到亚麻籽壳，用于亚麻籽多糖的提取；

2)亚麻籽多糖的提取：以步骤1)得到的干燥亚麻籽壳为原料，采用超声波辅助热水浸提法得到亚麻籽粗多糖提取液，过滤除去亚麻籽壳，收集滤液，离心除去不溶物，取上清液浓缩脱水并冷冻干燥后得到亚麻籽粗多糖；

3)脱蛋白和醇沉：步骤2)所得到的亚麻籽粗多糖加水溶解后采用木瓜蛋白酶脱除亚麻籽粗多糖中的游离及结合蛋白，酶处理后高温灭酶，离心除去变性酶沉淀，取上清液浓缩至适宜浓度后采用乙醇沉淀的方法除去醇溶性小分子，离心、复溶、冷冻干燥后得到初步纯化亚麻籽多糖；