[发明专利]使用来自木质纤维材料的生化转化方法的固体残留物生产酶混合物的方法

权利要求书

1.一种使用纤维素水解微生物生产酶混合物的方法，其包括两个阶段：

阶段a），使所述微生物在存在至少一种含碳生长底物的情况下，在封闭反应器中生长的阶段，所述生长阶段在10-90 g/L范围的含碳生长底物浓度下进行；

阶段b），酶混合物的生产阶段，其中提供至少一种含碳诱导底物，所述生产阶段在150-400 g/L范围的含碳生产底物浓度下进行；

其中：

所述含碳诱导底物是从经过预处理步骤的木质纤维材料的酶促部分水解步骤获得的至少一种固体残留物，所述固体残留物具有液体部分和固体部分，其中所述固体部分按重量计占所述固体残留物的10%-40%，并且所述固体残留物不具有从来自经过预处理步骤的木质纤维材料的酶促部分水解的酶促水解物的乙醇发酵获得的固体残留物，其中所述部分水解用酶混合物实施并在以下条件下进行：

- 以重量计大于20%的干物质的所述木质纤维材料；和/或

- 用小于10 mg酶混合物/克经过预处理步骤的木质纤维材料中的纤维素；

其中以重量计仅20%-70%在至水解步骤的入口处的纤维素被水解。

2.根据权利要求1的方法，其中所述固体残留物的固体部分中的木质素部分按重量计为45%-80%。

3.根据权利要求1的方法，其中所述固体残留物从酶促水解步骤的流出物分离。

4.根据权利要求1-3中任一项的方法，其中所述含碳诱导底物与选自诱导糖或非诱导糖的至少一种其它含碳底物一起作为混合物使用。

5.根据权利要求4的方法，其中所述其它含碳底物选自乳糖、葡萄糖、纤维素水解物、半纤维素水解物、纤维二糖和木糖，其单独使用或作为混合物使用。

6.根据权利要求1-5中任一项的方法，其中所述含碳生产底物包含按重量计至少5%的纤维素。

7.根据权利要求1-6中任一项的方法，其中在所述生产阶段b）中使用的含碳生产底物以在35-65 mg含碳底物/克微生物/小时的范围的特定流速提供。

8.根据权利要求1-7中任一项的方法，其中所述含碳诱导底物在木质纤维材料的预处理步骤结束时被分离。

9.根据权利要求1-8中任一项的方法，其中所述水解步骤以1 mg至小于10 mg酶混合物/克经过预处理步骤的木质纤维材料中的纤维素启动。

10.根据权利要求9的方法，其中所述水解步骤在按重量计大于20%至40%的干物质下进行。

11.根据权利要求1-8中任一项的方法，其中所述纤维素水解微生物选自属于木霉属、曲霉属、青霉属或裂褶菌属的真菌的菌株。

12.根据权利要求11的方法，其中所述纤维素水解微生物属于里氏木霉种。

13.根据权利要求1的方法，其中所述木质纤维材料所经过的预处理步骤是酸预处理步骤。

14.根据权利要求1的方法，其中所述木质纤维材料所经过的预处理步骤是蒸汽喷发步骤并预先使用硫酸水溶液浸渍所述材料。